Bucket_6z8c
最近需要筛选许多单克隆,每一个样品都计数的话耗时长,因为是检测细胞自带的GFP荧光,能不能大致取一部分细胞进行流式,细胞密度不同是否会影响流式荧光强度结果?
loveliufudan
在流式细胞术中,荧光强度主要受到荧光蛋白表达量以及荧光蛋白的荧光性质的影响,不直接受到细胞浓度的影响。每个细胞被单独分析,细胞的浓度只会影响到流式分析的速率,不会影响到单个细胞的荧光强度的读数。
如果你担心筛选的单克隆样品数量多,每一个样品都进行计数耗时太长,你完全可以从每个样品中取一部分细胞进行流式分析。只要样品中的细胞数量足够,你就可以得到统计学上具有代表性的结果。
细水长流NAPI
可以取一部分细胞进行流式,细胞密度不同会有影响
dxyc42u
细胞密度不同不会影响流式荧光强度
毛利小五郎的徒弟
可以直接测荧光强度和细胞密度来推测细胞数目的,不用每个都计数