溴化乙锭用于外排泵测定的原理
dxy_9ngo2c9r
我老师现在比较注重的点是溴化乙锭是我们的目的蛋白也就是外排泵的非特异性底物，为什么可以和我的底物一起被外排泵运出细胞外。求解答。
当以亚致死剂量使用时，荧光分子通过被动扩散进入细胞，但只能通过主动外排系统去除。因此，在任何时间点对染料的相对细胞内浓度的估计都可以与外排机制的活性直接相关。事实上，这些染料，特别是EtBr，在水溶液中（或在没有活细胞的培养基/缓冲液中）发出非常弱的荧光，但强度随着其在活细胞的细胞质/周质中浓度的增加而增加，这主要是由于染料与DNA等细胞组分的相互螯合。因此，具有低外排活性的细胞将具有更高浓度的细胞内染料，从而导致更高的荧光，反之亦然。
4 个回答
是TTT
第一，可以查一下你的目标蛋白的分子结构，看看二者是否有相似的结构
第二，可以查一下目标蛋白和溴化已锭进出细胞的方式及其比例是否存在一致
毛利小五郎的徒弟
在外排泵的测定中，溴化乙锭相当于荧光探针，可以随从目标物一起排出，起到测定的作用
loveliufudan
以下是一些可能的解释：
1. 相似的结构或性质：EtBr和您的底物可能具有相似的化学结构或性质，使它们都能被外排泵识别并运输到细胞外。外排泵通常具有广泛的基底特异性，能够识别并运输多种结构或性质类似的底物。
2. 共同的外排途径：EtBr和您的底物可能共享相同的外排途径。外排泵通常通过特定的转运通道或机制将底物从细胞内运输到细胞外。如果EtBr和您的底物都使用相同的外排途径，它们可能会竞争性地与外排泵结合并被一起运出细胞外。
3. 非特异性外排：某些外排泵可能表现出较低的底物特异性，导致它们能够识别和运输多种底物。这意味着即使EtBr和您的底物之间没有直接的结构或功能关联，它们仍然可以通过非特异性机制一起被外排泵运出细胞外。
需要注意的是，具体的分子机制可能因外排泵的类型和细胞类型而异。外排泵的选择性和特异性通常受到多种因素的影响，包括底物的结构、浓度、亲和力以及外排泵的调节等。为了更深入了解EtBr和您的底物一起被外排泵运出细胞外的具体机制，可能需要进行更多的实验和研究。
sswei
溴化乙锭可以嵌入底物分子中,导致错配，而一起外排
