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实验过程中,石蜡切片染色过程中总是出现脱片现象,怎么有效避免?

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tree2013

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6 个回答

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huarenqiang5

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一般来说,如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话,如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。可以试试一下的方法:


a.我们一般用APES:丙酮=1:50的处理液来处理片子,处理5min左右,然后水洗,烘干既可用于贴片。如果把水滴再处理好的片子上,水比较聚的话说明片子处理的好。


b.贴片子的时候,展片的时间要把握好,不要太长,否则不利于贴牢。


c.烤片子也很重要,切好的片子zui先不要马上收起来,而是水平至于烘片台上37度两个小时以上,一是水分烘干。然后做染色前zui再在60度烘箱烘1个小时。


d.石蜡包埋时,酒精梯度脱水以及浸蜡等一定要充分,这对贴片也有影响。

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蓝莓小布丁

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可能原因有:烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度;有些组织本身就容易掉片,如骨组织等,操作时冲PBS不要直接冲到组织上,冲到组织上方,让它流下冲洗组织。

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loveliufudan

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石蜡切片染色过程中出现脱片现象可能是由于以下原因导致的:

1.切片不充分脱脂:在石蜡包埋过程中,蜡渗透进入组织,如果组织内的脂肪没有被充分去除,会导致石蜡切片染色过程中出现脱片现象。可以通过脱脂剂去除切片内部的脂肪。

2.切片厚度不一致:切片厚度不一致也是导致脱片的一个原因,可以在切片时控制好切片的厚度,或者使用旋转微熔切片机等设备。

3.切片处理不当:切片在染色前需要经过脱蜡、脱水、再次脱蜡、再次脱水等步骤,如果这些步骤处理不当,也会导致脱片。可以加强对切片处理的控制,确保每一步处理得当。

4.切片和载玻片不充分接触:在制备切片时,如果切片和载玻片没有充分接触,也会导致脱片现象。可以在制备切片时使用静电吸附等方法使切片和载玻片更好的接触。

综上所述,为避免石蜡切片染色过程中出现脱片现象,需要加强对切片制备过程的控制,包括脱脂、切片厚度控制、切片处理和切片和载玻片接触等方面的控制。

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土井挞克树

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避免干片和脱水固定过度。脱片主要是因为水分太少。

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sswei

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石蜡切片在染色中造成脱片的主要原因是:组织固定不佳 ,脱水透明及浸蜡不当 ,切片刀不锋利,切片太厚 ,展片用水或载片不洁 烤片温度或时间不足。

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balalaLy

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使用防脱载波片,切片后要烤片要充分

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