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标记红细胞内的酶,应该用什么荧光(激发,发射波长),以避开红细胞的自发荧光?

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fans1640

之前用APC标记的,但是红细胞自发荧光太强,无法知道哪个红细胞内有酶,有多少酶?

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1 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

红细胞内血红蛋白会产生自发荧光

红细胞的自发荧光减少方法

  1. 交联固定诱发。使用非醛类固定剂,比如冰乙醇,可有效降低交联固定而诱导的自发荧光。
  2. 红细胞。动物组织取材固定前,先用PBS进行灌注。
  3. 先进行预实验。检测自发荧光的波长范围,再选择与自发荧光荧光信号波长相差较大荧光信号。
  4. 组织自发荧光淬灭剂。自发荧光淬灭试剂中的离子可通过碰撞方式,捕获自发荧光光源分子发出的电子,阻止该电子从激发态回归基态和能量释放,从而淬灭自发荧光。需要注意的是:不同物种不同类型组织的自发荧光具有不同的特征,使用组织自发荧光淬灭剂的效果可能会有差别;另外,淬灭剂会在一定程度上降低抗体荧光强度。
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