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请问,谁做过fitc-dextran的细胞通透性实验,求实验方法与步骤

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上善若水ling

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5 个回答

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未来9

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可以参照这篇硕士论文《基于PI3K-AKT通路探讨泽泻醇A改善脑微血管内皮细胞氧糖剥夺损伤的机制研究》和博士论文《LIPUS联合SonoVue对肾小球内皮细胞的影响及机制研究》

通透性检测方法步骤如下:

将细胞接种于含0.4 um 孔聚碳酸酯膜的6.5 mm Transwell小室,培养Sd至细胞融合,进行OGD 处理,再予以不同含药培养基复氧,CO2继续培养24 h。然后将上室培养基更换为含20 ug/mL FITC-Dextran (70KD)的培养基,20 ug/mL 70KD培养基避光现配现用,更换下室培养基,填充新鲜650 uL无菌PBS. CO2培养箱避光孵育1h后,将下室的PBS 收集起来,使用荧光酶标仪 在493 m激发波长和518 m发射波长下测量PBS 中穿过下室的相对茨光含量。 细胞通透性实验方法示意图见附图7。

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汤姆卜丽波

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看看这个文章https://wk.baidu.com/view/ea323b0ba9ea998fcc22bcd126fff705cd175c46

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balalaLy

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预热D-hank液至37 ℃,清洗Transwell顶室、底室1次,分别添加FITC-葡聚糖(1 mg/ml)100 μl、D-hank液500 μl,置于96孔板内,37 ℃、5%CO2条件下孵育2小时。取底室液体,采用多功能读板仪(芬兰Thermo公司)检测样品荧光长度,激光波长480 nm,发生光波长520 nm,重复测量5次取平均值。

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bamboopiggy

有帮助

你们学校如果有jove,你可以看看这个视频https://www.jove.com/cn/v/57032/in-vitro-vivo-approaches-to-determine-intestinal-epithelial-cell?language=Chinese

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天一湖医者

有帮助

fitc-dextran的细胞通透性实验,参考这个,https://www.hbzhan.com/tech_news/detail/453498.html

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