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wb中杂带有很多,没法区分

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是个幸运的小朋友

NLRP3条带总有杂带怎么办

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2 个回答

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

1.低效阻塞。

实验中会应用到多种不同的封闭剂,某些非离子去污剂或蛋白质等封闭剂容易产生低效阻塞的影响。如果改变阻塞条件就可以解决此问题。

2. 抗原浓度过低。

信号增强可能会导致人工带的出现。因此可以适当考虑通过分级分离或免疫沉淀富集抗原。

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府宅

有帮助

1. 抗原的蛋白水解分解。

特别是如果样品储存时间过长,或者在起始组织均质化后分离蛋白质或膜。所有附加条带的表观分子量均低于全长蛋白质。特别易感的是突触蛋白和突触结合蛋白。应考虑添加蛋白酶抑制剂,如 PMSF、胃蛋白酶抑制剂或亮抑酶肽。

2. 每条泳道蛋白质过多或检测系统过于敏感。

蛋白质免疫印迹法中,凝胶过载是“鬼带”的常见原因之一。固定的蛋白质可以提供一个集中的吸附表面,某些 IgG 可以非特异性地结合到该表面。类似地,当使用高度灵敏的检测系统(例如增强的化学发光)时,可能会发现这种非特异性结合。

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