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诱导条件30度,转速200
小布丁瑶瑶
可以使用中等强度或弱的启动子,低温培养,有限的诱导,优化培养基条件,进行融合表达,可以避免出现内涵体。
府宅
(1). 形成的很大一部分原因是蛋白表达过快引起的,那么降低诱导温度,例如25–30°C,或降低IPTG浓度(0.01–0.1mM)并延长诱导时间,或者换用作用较弱的启动子,以此来减缓表达的速度
(2). 用自诱导培养基来替换IPTG诱导
(3). 携带大标签如GST、 TrX共表达来增加可溶性
(4). 分子伴侣
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一是预防,二是复性。
先说“预防”,预防就是指在蛋白过表达形成包涵体前,对表达环境进行优化的一些手段,来降低重组蛋白合成的速率。例如:密码子优化,表达温度的选择,与分子伴侣或折叠酶共表达等等;
而蛋白质的复性则是指:在变性条件不剧烈,变性蛋白质内部结构变化不大时,除去变性因素,在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性的方法。