豆包汤圆
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因为淋巴细胞是悬浮生长,而肿瘤细胞一般要贴壁生长,所以可以采用简单的混合共培养的方法;如果是要有效的刺激淋巴细胞,选用合适的DC细胞也很关键;如果是要检测细胞因子的作用,也可采用共培养的方法;总之,目的不同,方法也不尽相同
可以尝试这样一个方法,目的是看人外周血细胞是否被肿瘤细胞所刺激:
肿瘤细胞贴壁培养,3000拉德照射或丝裂霉素处理使得细胞不再增殖,但仍保持存活,提取人外周血单个核细胞,与肿瘤细胞共培养,并加入白介素2,PMA。
本方法的原理是考虑肿瘤细胞表面具有肿瘤抗原,在细胞因子及丝裂原的作用下能够激活外周血淋巴细胞。
我试过有的细胞能激活T淋巴细胞增殖,如sk-ov-3等。
府宅
按照抗原递呈-杀伤的理论来讲,首先得有肿瘤细胞特异性抗原,在体外环境与pbmc诱导来源的DC共培养后,加入t细胞体系活化T细胞,再将t细胞与肿瘤细胞共培养。但实际操作是你把t细胞和肿瘤细胞扔一起,确实会有T细胞活化,hla表达上调,只是这个比例极低。
txs900416
看楼主的目的。一般都是分离免疫细胞和肿瘤细胞,按相应比例混合即可。若希望免疫细胞作用强一点,可E:T=10:1或者5:1加,若希望弱一点,可1:1加。