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COIP研究蛋白互作过程中,待检测的蛋白分子量在55kD时,经常被抗体的轻重链挡住,有什么好的解决方案

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努力努力再努力ACK4

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3 个回答

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txs900416

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使用不同来源的抗体做ip和验证可以避免,如果所有抗体都是相同来源的,可以使用二抗为抗相应igg轻链的抗体验证

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小暮

有帮助

捕获抗体、检测抗体采用不同来源物种,使用针对检测抗体物种的特异性二抗;比如:假设你IP的抗体是兔抗的,目的蛋白进行WB的抗体就选择鼠抗,干扰会小很多。

文献说可以用恒定区的纳米抗体,很贵

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dxywode

有帮助

捕获抗体、检测抗体采用不同来源物种,使用针对检测抗体物种的特异性二抗;如果有可能,捕获抗体采用没有恒定区的纳米抗体。受限于财力和市场供应,上面两个解决方案都不是那么容易实现的。不过如果您准备做标签蛋白的IP,为您提供的解决方案,可以完美避开重链轻链杂信号的干扰。

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