细胞复苏

首页

一、原理      在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。      细胞复苏时速度要快，使之迅速通过细胞最易受损的-5～0℃，细胞仍能生长，活

细胞的冻存和复苏

			基本原理： 在长期的细胞培养过程中可能会出现微生物污染或基因型改变等情况，会导致具有优良特性细胞系的丢失。为防止这些细胞的丢失，细胞可以经快速冷冻并几乎无限期保存在非常低的温度下，如液氮（-176℃）。 试剂和设备： 冷冻液: 90%灭活血清+10%DMSO（或甘油），用0.45μm微孔滤膜过滤除菌，4℃保存； 培养液； 台盼蓝溶液（0.4%溶解于PBS）； 70%乙醇； 组织培养瓶； 15

细胞冷冻和复苏[2]

			基本原理：			在长期的细胞培养过程中可能会出现微生物污染或基因型改变等情况，会导致具有优良特性细胞系的丢失。为防止这些细胞的丢失，细胞可以经快速冷冻并几乎无限期保存在非常低的温度下，如液氮（-176℃）。			试剂和设备：						冷冻液: 90%灭活血清 10%DMSO（或甘油），用0.45μm微孔滤膜过滤除菌，4℃保存；					培养液；					台盼蓝溶液