菜鸟做ELISA实验操作体会1.标本收集：这个很关键呀！标本收集及保存的好坏，直接决定了实验能否成功。在收集标本之前必须考虑到实验对标本收集及保存的要求，这些要求对标本中待测物质稳定性影响很大。以ELISA为例。ELISA检测的一般是液态标本，应在收集到新鲜标本后立即离心留取上清液1ml左右移入高温灭菌过的1.5ml EP管中。这种标本在4度保存48小时，-20度保存1个月，-80度保存6个月对检测影响不大。样本一般 ...
ELISA的概念、原理、操作步骤ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗 ...
8D这是个非常有意义的讨论，相信对大家的实验有所帮助。如果觉得好，别忘记顶贴，以使更多同学能分享。ELISA相关讨论 文字优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规 ...
前几日想找一些ELISA的资料看看，于是搜遍了本版，把所有的有关ELISA帖子都给搜出来了。今日就帖出来方便大家吧...............（求助）如何提高ELISA灵敏度 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=141506&sty=1&tpg=91&age=0请教各位ELISA高手http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=68&id=421466&sty=1&tpg=88& ...
ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,本人在刚开始做ELISA时就面临很多困难,虽然有师兄师姐铺路,但还是常常做得一塌糊涂,比如说花板,假阳性,全显色,全部显色,显色比空白还低......自己也为此苦恼过很长一段时间,随着自己技术水平得提高,或多或少地也掌握了ELISA体系的脾气,也是熟能生巧吧,现在做方阵,做ELISA已是轻车熟 ...
石蜡切片及HE染色过程一 石蜡切片1. 取材: 刀片要求锋利而薄,组织厚度约2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2～0.3cm为宜. 取材时间越快越好.2. 固定: 组织取下后应立即放入10%福尔马林(相当于4%甲醛)固定.注意: (1). 固定液量应为组织块体积的40倍.(2) 固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小, 温度等有关. 一般为3—24h.(3)固定温度大多可在室温固定, 在低温(4℃)时间应延长.(4)固定容器应大些.3. 漂洗: 流水冲洗2—10h.4. 脱水: 从低浓度酒精到高浓 ...
ELISA的技术要点包括三个方面：试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。 一、试剂的制备 ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。 （一）固相载体 可作ELISA中载体的物质很多，最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式。在ELISA测定过程中，它作 ...
1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的？FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度， FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用，用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择？同型对照（Isotype Control）：使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。如果一抗是多抗，可以用an normal serum（与一抗相同的正 ...
1、免疫检测的基础知识ELISA是一种免疫测定。免疫测定（immunoassay，IA）是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。1.1 抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后，可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中，抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。小分子化合物在与大分子蛋白质结 ...
苏木素－伊红染色（HE染色法）整个染色过程包括五个内容：脱蜡,染色,脱水,透明和封固。(一)脱蜡:1.从温箱中取出烤干的切片,立即投入二甲苯中脱蜡5～10min(可在二瓶中进行),脱蜡时间长短取决于蜡是不彻底溶解。气温低可延长时间,气温高可适当缩短时间或在温箱中加速脱蜡。2.移入无水酒精(100%)(二瓶)中,约2min。3.移入90%酒精中(二瓶),约2min。4.移入80%酒精中(二瓶),约2min。5.移入70%酒精中,约2min。6 ...
北京地区1.北京万泰生物药业有限公司北京万泰生物药业有限公司目前有卫生部颁发的甲肝,乙肝，丙肝,艾滋病,梅毒等9个体外诊断试剂生产文号,成为国内生产体外诊断免疫诊断试剂品种最全的厂家之一.公司近年来发展迅速,在国内市场具有一定的知名度.为满足日益扩大的市场需求,于99年2月按国家卫生主管部门要求的最高水平建成GMP厂房并投入使用,成为国内第一家GMP 认证要求实施的体外诊断试剂生产企业.公司提供了血源筛查的全套试 ...
AAgNOR染色法:1、试剂配制：（1）AgNOR染色液：甲液：明胶2 g 溶于双蒸水至99 ml，在60℃使之完全溶解，再加入纯甲酸1 ml 摇匀待用。乙液：硝酸银50 g 溶解于双蒸水中至100 ml，4℃冰箱保存。（2）AgNOR工作液取甲液10 ml，乙液20 ml 临用前混合。2、步骤：（1）切片脱蜡至水（2）双蒸水洗2次（3）AgNOR 工作液中（25℃）浸染30分钟（暗处进行）（镜下观察）（4）双蒸水洗3次（5）脱水,透明,封固3、结果：油镜观察，细胞核及胞质背景为淡黄色， A ...
免疫组化、Western、ELISA，免疫学三大工具，分别用于定位，定性和定量。 IHC(免疫组化Immunohistochemistry)是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等)，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素)显色，来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织，要在显微镜下观察结果，可能出现膜阳性、质阳性和核 ...
Roitt's Essential ImmunologyBy Peter J. Delves, Seamus J. Martin, Dennis R. Burton, Ivan M. Roitt - John Wiley & Sons (2011) - Paperback - 546 pages - ISBN 1405196831"Roitt's Essential Immunology - the textbook of choice for students and instructors of immunology worldwide Bringing you fully up-to ...
Dimtry Gabrilovich 应该是MDSC领域的大牛了，近年他的文章和综述多发表在Nature及其相关期刊，2011年还应邀Nature Immunology写了过去10年免疫学界10大最重要的发现中关于MDSC的部分，足见其影响力。发现论坛上关于MDSC的讨论不多，最近找了他近三年来的3篇综述供大家学习，希望读后大家都对MDSC有个初步的认识。Myeloid-derived suppressor cells as reg ...
A groundbreaking discovery of a new type of immune cells, Th22, which can protect the body against inflammation, may lead the way to new treatments for inflammatory skin diseases such as psoriasis and respiratory diseases such as asthma. Word of the Th22 discovery comes from scientists of Helmho ...
Immunology Lecture Mini-Course，网友说讲的就是“Janeway's Immunobiology”。视频，是MP4格式，文件共有4.62G，非常清晰。1 hg-components-of-the-immune-systemhttp://pan.baidu.com/share/link?shareid=113251&uk=2041140792 hg-innate-immunityhttp://pan.baidu.com/sh ...
上皮及间皮类常用标记抗体EPITHELIAL AND MESOTHELIAL MARKERSCK (MNF 116)- MNF-116 is a pan-cytokeratin antibody.- Source: Dakopatts.- Dilution 1:50.- Antigen retrieval method: HIER (pressure cooking) using EDTA.- Staining pattern: Cytoplasmic, typically fibrillary, with or without acc ...
1、Methanol-Acetone FixationFix in cooled methanol, 10 min at –20 °C.Remove excess methanol.Permeabilize with cooled acetone for 1 minute at –20 °C.2、Paraformaldehyde-Triton FixationFix in 3-4% paraformaldehyde for 10-20 min.Rinse briefly with PBS.Permeabilize with 0.5% Tri ...
免疫学精彩资料http://www.med.sc.edu:85/book/immunol-sta.htm全部提供全文（部分章节pdf需要MM但html全文仍免费开放，很容易作成pdf），内有大量图片和幻灯。另外还有BACTERIOLOGY、VIROLOGY、PARASITOLOGY、MYCOLOGY四部书和ppt幻灯提供下载。《免疫学》章节内容CHAPTER ONEINNATE (NON-SPECIFIC) IMMUNITYCHAP ...
