免疫印迹又称蛋白质印迹（Western blotting），是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中 的某种蛋白的方法。其基本流程是先将待检测样品溶解于含有去污剂和还原剂的溶液中，经过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离各组分，然后通过印迹技术把分离样品几乎原位、定量转 移到 NC 膜上。随后用特异抗体与 NC 膜上的靶抗原反应，结合上的抗体可用与辣根过氧化物 酶或碱性磷酸酶偶联的抗免疫球蛋白进行反应，最后通过与酶的底物发生显色反应来做检测。 由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白 分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。结 合化学发光检测，可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。

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3D 条件下培养的细胞可以更好地模拟体内生理或病理状态，3D 培养技术的革新不仅促进了肿瘤和神经生物学的研究，同时加速了化合物代谢或毒性评价的进程。3D 细胞培养还可以用于大规模生物药的生产，包括干细胞及免疫细胞治疗产品的制备或检测，3D 细胞培养的优势也越来越显著。

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流式细胞术因其具有检测速度快、测量指标多、采集数量量大、数据分析全面、检测方法灵活等特点，已经成为生命科学研究、临床医学检验等学科不可或缺的技术之一。应用最为广泛的如细胞凋亡检测、细胞周期检测、免疫分析等。但是在试剂操作中，经常会遇到凋亡检测死细胞偏多，超出预期，周期分期不明显，Th 细胞刺激不出，细胞因子检出值低等问题，如何解决这些常见的问题，本次直播综合公司十多年研发实战经验，分享公司研发过程中遇到这些问题的解决方案，可以帮助大家少走弯路，顺利完成流式实验。

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外扩增核酸片段的基因检测技术，具有简便易行、灵敏度高等特点。传统的PCR定量是应用终点PCR来对样品中的模板量进行定量，通常用凝胶电泳分离，并用荧光染料来检测PCR反应的最终扩增产物。但是普通PCR扩增已经满足不了分子生物学的研究，荧光定量PCR（Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction，QPCR）技术实现了PCR从定性到定量的飞跃，以其快速、特异性强、重复性好、定量准确、可实时监测等优点成为了分子生物学研究中的重要工具。本讲座从QPCR原理及部分实验操作细节、相关图片了解等方面，概述QPCR内容。

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