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苏云金杆菌的部分生化试验鉴定

一、目的要求:应用生物化学技术对昆虫病原细菌进行鉴定,乃是一种十分简便快速的方法,鉴定苏云金杆菌的生化指标是:V、P反应,卵磷脂酶,蛋白水解,吐温酶,水杨素,七叶灵、蔗糖、甘露糖、表膜、酶、淀粉、几丁质酶、精氨酸脱羟酶等。本实验是通过简单的生化测定来了解苏云金杆菌的生化鉴定技术。二、实验材料:天平、电炉、药勺、量筒、烧杯、pH试纸7、高压锅(手提式)、接种环三、实验内容:1. 各种糖利用:蛋白胨 1%,琼脂 2%,蔗糖(甘露糖)1%,水杨素 0.5%,1%酸性复红水溶液 0.5%。蛋白胨加热溶于水中,加入酸性复红水溶液。分别加入一种糖加热溶解,以不加糖的蛋白胨作对照。分装试管,调pH至7.58,灭菌30分钟。接种后于30℃恒温培养检查产酸情况,若培养基变红者为正反应。2. 七叶灵利用:牛肉膏 1%,七叶灵 0.5%,琼脂 2%,另配5%三氯化铁水溶液单独灭菌。培养基溶后,先将三氯化铁每皿滴入2滴,后倒平板混匀。凝固后电接菌种,30 ℃培养3-5天。菌苔周围出现深褐色区为阳性反应。3. 淀粉水解试验:牛肉膏 5克,NaCl 5克,可熔性淀粉 5克,琼脂 10克,蒸馏水 1000毫升。将试

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氧化钙的安全知识

(一)理化性状和用途白至灰白色块状或颗粒状粉末,可能杂有黄色或棕色,无气味。用来制造玻璃、纸浆和纸、建筑材料、家禽饲料和其他化学品。(二)毒性具有刺激的腐蚀作用。最高容许浓度:2(三)短期过量暴露的影响吸入:能刺激鼻、喉和肺,打喷嚏和咳嗽,通常不会产生严重危害。眼睛接触:会严重灼伤角膜,可以造成失明。皮肤接触:能造成严重刺激、灼伤和损害皮肤。口服:能灼伤口腔、喉,产生呕吐、腹泻和虚脱。(四)长期暴露的影响无影响记录,重复和长期接触可能出现有发痒、变红和肿胀的皮炎。(五)火灾和爆炸不燃烧,能与某些化合物反应产生足够的热量使附近的易燃物质起火,不可用水来扑灭.(六)化学反应性稳定.与强酸类、氯、三氟化硼、氢氟酸起激烈反应,与水混合能产生热量。(七)人身防护吸入:如粉尘及烟雾浓度不明或超过暴露限值时,应戴用1级防尘口罩。皮肤:如需要应使用手套、工作服和工作鞋。合适的材料是天然橡胶、氯丁橡胶,工作场所应备有安全沐浴和眼睛冲洗器具。眼睛:使用防尘或防溅的安全眼睛,必要时还应有防尘面罩。(八)急救脱离氧化钙产生源或将患者移至新鲜空气处。眼睛接触:迅速擦去残余物,用水冲洗澡间30分钟以上。皮肤接触:

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心血管活动的神经调节

佚名 心肌和血管平滑肌接受自主神经支配。机体对心血管活动的神经调节是通过各种心血管反射实现的。 (一)心脏和血管的神经支配 1.心脏的神经支配支配心脏的传出神经为心交感神经和心迷走神经。 (1)心交感神经及其作用:心交感神经的节前神经元位于脊髓第1-5胸段的中间外侧柱,其轴突末梢释放的递质为乙酰胆碱,后者能激活节后神经元膜上的N型胆碱能受体。心交感节后神经元位于星状神经节或颈交感神经节内。节后神经元的轴突组织心脏神经丛,支配心脏各个部分,包括窦房结、房室交界、房室束、心房肌和心室肌。 在动物实验中看到,两侧心交感神经对心脏的支配有所差别。支配窦房结的交感纤维主要来自右侧心交感神经,支配房室交界的交感主要来自左侧心交感神经。在功能上,右侧心交感神经兴奋时以引起心率加快的效应为主,而左侧心交感神经兴奋则以加强心肌收缩能力的效应为主。 心交感节后神经元末梢释放的递质为去甲肾上腺素,与心肌细胞膜上的β型肾上腺素能受体结合,可导致心率加快,房室交界的传导加快,心房

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Taqman-LNA探针的合成

什么是LNA LNA 是新型的核酸类似物,它包含了2'-氧4' 碳亚甲基连接,这个连接限制了呋喃核糖环的灵活性,因而将其结构锁定成一个刚性的双环模式,因此而提高杂交效率和优越的稳定性。 LNA 荧光探针优点 1.增强热稳定性和杂交的特异性 对实时定量PCR探针提出LNA化学产品增强双链体的热稳定性,同时加强对目标序列杂交的特异性。因此,由非所需激活的荧光背景将大量减少,从而使信号对背景噪音的比例增大。 LNA 单分子的化学结构决定了其探针与目标序列杂交后的稳定性,与普通的DNA荧光探针相比,其双链在相同的盐溶液中,每增加一个单体LNA分子将导致其熔点提升8°C。强化后的杂交性能可以显著的扩大实验检测的环境限制,同时允许在单试管中进行更复杂的试验。可以通过调整LNA碱基在探针中的位置来调节最佳熔点(Tm)和杂交的特异性。 2.更易及灵活的探针设计来检测有问题的目标序列

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生物芯片实验样本选择和设计

基因芯片对样本的选择非常重要,选用有效的样本可以使实验结果可靠。但是基因芯片对样本要求非常高,理想的样本往往得不到。因此,在可选择的范围内,样本的选择和设计非常重要。 1. 待测样本的选择: 基因芯片需要的样本来源非常广泛,可以是组织来源的或血液来源的,也可以是培养的细胞或病人的体外分泌物等等,可以根据不同的检测目标选用不同的样本。一般来讲,组织标本比较宝贵,也较难获得,病人付出的代价较高。对内源性基因的检测用活检组织最好,也可以用培养细胞代替,但结果要大打折扣。而对基因功能的研究,培养细胞是一种很好的工具,可以针对不同诱导物的诱导进行基因表达差异的筛选。对外源性病原体的检测,绝大部分用血液(血清或血浆)就可以,部分传染病可以用病人的分泌物或排泄物,但仍有一些基因的检测需要特殊的组织,如梅毒的早期诊断需要选用脑脊液等。 2. 对照样本的选择: 对照样本在研究基因差异表达时是必不可少的,组织表达谱芯片一般选用正常的相同组织与病例组织作为对照;不同病程期的组织也能够进行对照实验,样本的选择最好来源于同一个个体。但选择不同个体不同病程的组织是实际操作过程中常用到的方法。在进行药物

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肺组织结构与大小叶性肺炎的观察

【实验目的】 1. 观察肺组织的解剖结构,掌握肺的形态、位置和分叶。 2. 观察肺的组织结构,掌握支气管壁的分层和肺泡的结构特点,了解肺导气部、呼吸部的组成。 3. 观察大、小叶性肺炎的大体标本和组织切片,掌握两者的病变特点及形态的异同点。 【实验对象】 尸检来源的正常肺和组织切片,大叶性肺炎和小叶性肺炎的大体标本和切片。 【实验内容】 1. 肺组织的解剖结构 (1)支气管:支气管由肺门进入肺部,呈树枝状分布。 (2)肺:一尖、一底(膈面)、二面(内侧面、肋面)和三缘(前缘、后缘、下缘)。肺尖圆锥形,高出锁骨内侧1/3上方2.5cm;底部略向上凸;内侧面中部为肺门,支气管、肺动脉、肺静脉由此出入肺部,肋面圆凸;肺的前缘锐薄,左肺前缘有心切迹,后缘钝圆,下缘较锐。 左肺分两叶,右肺分三叶,每一细支气管连同它的各级分支和肺泡,组成了肺小叶(pulmonary lobule),直径约1cm。 2. 肺的组织结构 (1)支气管壁结构:分为黏膜层、黏膜下层和外膜。黏膜上皮为假复层纤毛柱状上皮,固有层含小血管、导管;黏膜下层见浆液性腺泡和黏液性腺泡;外膜为软骨、平

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细胞培养技术在肿瘤方面的研究

癌细胞有一系列不同于正常细胞的特性,如分化程度减弱,细胞形态和功能异常,自主性生长,浸润转移性和免疫性异常,体外培养无接触抑制和在软琼脂中形成集落的特性,癌细胞体外培养是研究癌变机理和癌细胞行为的极好方法,能为肿瘤病因学、遗传学和药理学等提供便利的条件。同时也是研究癌细胞的药物敏感性和诱导分化发生恶性逆转的最理想的对象。一、肿瘤病因和发病机制的研究癌细胞在体内恶性变时,易于形成肿瘤,但到体外培养时往往又难以培养成功,这不仅仅是因成纤维细胞的抑制作用,更重要的是体外缺乏有利于生长的微环境,由此可见环境对癌发生和发展是有很大作用的。在肿瘤细胞的动物致癌实验时,所选择的动物都是经理化因素处理后造成骨髓和免疫抑制的动物或细胞免疫功能缺陷的无胸腺裸鼠,这也可以证明肿瘤细胞在这种动物体内易于形成肿瘤,也是与动物体内的微环境有关。体外正常细胞的转化试验中更进一步证明了物理因素(如射线)化学因素(化学致癌剂)及生物因素(致癌病毒、EB病毒、SV40和多发瘤病毒等),均能使正常细胞发生转化,致使正常细胞永生化或恶性化。为癌的诱发因素和环境提供了实验依据,环境因素或药物的致畸,致突变研究也可为该环境条件或

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高分子物质溶解用于细胞实验的方法

【求助】高分子物质如何溶解用于细胞实验?参与者:lihai584我做的实验是考察一种高分子物质对细胞的作用,现在碰到的一个问题是用什么来溶解这种高分子物质。看到别人考察某种药物对细胞的作用,通常选用的方法是用培养基溶解药物,然后和细胞共孵育;我选用的那种物质水溶性很好,但是由于是高分子多糖,所以在预定的浓度下黏度很大。现在用流式细胞仪进行检测,这个难点更加突出。方案一:细胞培养,加入高分子物质溶液,共孵育后酶消化,荧光燃料染色,流式细胞上机。缺点是无法考证流式结果的差异是否来自酶消化还是来自高分子物质的加入方案二:细胞培养,酶消化成单细胞悬液,加入高分子物质溶液共孵育,荧光燃料染色,流式细胞上机。基本可以排除酶消化的影响,但是由于黏度问题,物质无法和细胞很好接触并作用于细胞。请问大家这种情况应该怎么办呢?检测方案没有定下来,细胞都还没有开始培养,恳求高手指点啊,谢谢!参与者:zhaoyueshui试一下无水乙醇或DMSO参与者:lihai584无水乙醇或者DMSO是不是对细胞会有影响呢?参与者:zhaoyueshui如果只用几微升的话,应该没问题.当然最好对照也加相应体积的无水乙醇或者

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罗氏9180全自动电解质分析仪操作规程

一.仪器的开关机1.开机电源开关位于机器的后面,打开后,仪器自动进行预温。在预热结束后仪器提示进行日常清洁和日常调整,然后自动运行定标。2.关机21.若9180电解质分析仪短时间关机,可先设置为待机模式,然后关闭电源。程序:操作功能运行待机模式,待机模式可在任何时间取消,在经过必要的定标后回到“READY”状态。22.若9180电解质分析仪要停机超过3天,应排空管道,取出泵管,垫好电磁阀垫片。(最好与工程师联系)9180电解质分析仪的标准操作规程二.质量控制21.每天至少用推荐的Rhe质控液测仪器一次,以确定仪器的重复性和准确性。测量时,仪器必须至于READY状态。22.具体操作规程:准备好质控物,确认质控水平确认机器处于“Rey”状态进入程序“质控/标准液/透析液/尿液标本质控1(或质控2或质控3)”,按:“Yes”键根据屏幕提示,打开进样门将质控物移至进样针,使进样针完全浸入质控物“嘀”一声响后移开质控物用纱布擦拭进样针外壁关闭进样门,等待质控结果输出2.3测量完毕,测量结果将显示并打印。如果测量值在输入的目标范围以内,测量值将被自动保存。2.4如果测量值不在输入的目标范围以内,操

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内切酶的特性、酶解与琼脂糖凝胶电泳

学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法,理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具,琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具,所以常常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等一起称为工具酶。琼脂糖凝胶电泳:是利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下带负电的核酸分子就可以向阳极迁移。琼脂糖凝的浓度影响给定大小的线状DNA的迁移率,因此采用不同浓度的凝胶可以分离不同大小范围的DNA片段。EB:即3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲锭溴盐,(Ethidium Bromide)。它能够插入DNA分子中的碱基对之间而与DNA结合。由于EB分子的插入,在紫外光的照射下,凝胶电泳中的DNA条带呈现出红色荧光,易于检测。可以检测10ng 的DNA。质粒pCMV-Myc-T10 NEB 标准分子量片段(1kb DNA Ladder)EcoR1 和Xho1 核酸内切酶(Takara)EcoR 1和Xho

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什么是酶胆分离?

ALT与AST主要分布在肝脏的肝细胞内。肝细胞坏死时ALT和AST就会升高。其升高的程度与肝细胞受损的程度相一致,因此是目前最常用的肝功能指标。这两种酶在肝细胞内的分布是不同的。ALT主要分布在肝细胞浆,AST主要分布在肝细胞浆和肝细胞的线粒体中。因此,不同类型的肝炎患者的ALT和AST升高的程度及其AST/ALT的比值是不一样的。急性肝炎和慢性肝炎的轻型,虽有肝细胞的损伤,肝细胞的线粒体仍保持完整,故释放入血的只有存在于肝细胞浆内的ALT,所以,肝功能主要表现为ALT的升高,则AST/ALT的比值<1。重型肝炎和慢性肝炎的中型和重型,肝细胞的线粒体也遭到了严重的破坏,ast从线粒体和胞浆内释出,因而表现出ast alt="">1,甚至>2。酒精性肝病的患者,AST的活性也常常大于ALT。但是重型肝炎肝功能衰竭由于肝细胞大量坏死,正常肝细胞数量少,转氨酶的生成、释放少,而血清胆红素则显著升高,出现"胆-酶分离"的现象,提示凶险。 转氨酶的高低变化对于肝炎病人来说是非常重要的化验指标。一般来说,急性肝炎在病程4-6周内转氨酶应降至正常。肝炎复发时转氨酶升高可先

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DY-2001型生物芯片点样仪机械结构的确定

1、引言通过对生物芯片点样仪市场的调研,特别是经过对美国的Genemachine公司、Cartesain公司以及英国的Biorobotics公司等几个品牌生物芯片点样仪厂家产品的现场考察,在汲取了它们的优点的基础上,形成了我们将要自主研发的DY-2001型生物芯片点样仪的机械结构的构想。2、载片台的确定由于研发DY-2001型生物芯片点样仪是我们进入点样仪市场的第一步。经权衡决定暂不采用像Biorobotics的MGII那样多层可移动式载片台的复杂结构,从而确立了简捷稳固的单层固定式载片台的雏形。为兼顾生产与科研两类用户的不同需求,载片量初步定为100。在载片台的布局上,力争做到摆放尽可能多些的样品盒、又不削减必要的双清洗槽和真空吸干。为充分利用空间,玻片的限位采用的是我们独创的小针轴方式。除了玻片台左上方因同方向的玻片已不能摆放而无法利用以外,其它部分的面积已经用到了极限。3、机械核心部分结构的确定在拟定点样仪机械核心部分的结构之前,我们首先分析了几个著名品牌点样仪的结构特点、点样精度水平,以及存在的不足。由于无法预测点样仪在今后几年内的发展究竟有多快,所以我们把将要研制的点样仪的点

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药物对离体子宫的影响 实验指导

药理学实验 药物对离体子宫的影响 【目的】 1.观察缩宫素、益母草煎液对离体子宫活动的影响。 2.了解动物离体子宫制备的操作方法。 【原理】利用未孕动情期小鼠、大鼠或家兔离体子宫置于合适营养液环境中的自主张力活动,观察缩宫素、益母草对子宫平滑肌的作用。 【器材】 手术器材、恒温浴槽、 生物 信息(bioinformation)处理系统、张力传感器等。 【药品】5μ/ml缩宫素、50%益母草煎液、乐氏液。 【动物】 小白鼠、或大白鼠、或家兔。 【方法】 1.标本制备 取25g以上处于动情期的雌性小鼠(实验前2日ip已烯雌酚注射液0.1ml/只,可促使其进入动情期),每组1只,脱颈椎处死后剪开腹腔,找出子宫,轻轻剥离;在子宫二角相连处下端剪断,取出子宫,置于有营养液的培养皿内,仔细剪除附着在子宫上的结缔组织和脂肪组织。然后将子宫二角相连处剪开,取一角,剪取2cm,一端用标本钩钩上固定在浴槽底部,另一端用线结扎与传感器相连。浴槽的营养液以能浸没子宫为宜。水浴温度为37±0.5℃,静置15min,待子宫适应后,开

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Southern 杂交一般操作

一 酶切和电泳 在200 μl 微量离心管中加入: 25 μl DNA样品约10μg), 3μl 限制性内切酶(MBI,10 U/ μl) 5 μl 相应的10×buffer, 补水到50μl。 然后加一滴矿物油覆盖, 稍微离心后放于37℃水浴8-12小时。酶切完后,取5μl 酶切DNA样品于0.8%的琼脂糖凝胶上检测酶是否充分。如果酶切充分,灌制0.8%的agrose胶,加入上样buffer后,在25—30V稳压电泳12—16hrs。 注意:在southern杂交中对,DNA的质量要求较高,否则酶切不完全导致失败。 二 转膜 1 用0.2MHCl 脱嘌呤处理,偶尔轻轻振荡至溴酚蓝完全变成黄色,大约需要15~30分钟。然后用水漂洗凝胶2~3次,将水倒尽,加入碱变性液,偶尔轻轻振荡至溴酚蓝完全恢复到原来的蓝色(大约需要20~30分钟)。 注意:此方法对酶切后目标片段大于15kb时用,如果小于15kb最好不要进行脱嘌呤处理,否则容易将片段打断,导致转膜后

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应用差异显示法对小细胞肺癌转移相关基因的筛选

[摘要] 目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因,揭示肺癌的转移机制。方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段,测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BLAST检索分析其同源性。结果:小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达具有明显差异,共获得差异片段(EST,表达序列标签) 24个,选择差异明显的3个片段克隆测序后,发现3片段均位于肿瘤高度相关的3q、7q和10q, 均为未知序列,未发现同源基因,可能为新的基因片段。用RT2PCR对位于抑癌基因PTEN上游的L1片段进行验证的结果证实了该片段在小细胞肺癌的高表达率,具有统计学意义( P < 0. 05) 。结论:人小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达存在差异,所测序的3个基因片段均为未知基因序列,这些片段可能为小细胞肺癌的转移相关候选基因,其序列和功能值得进一步深入研究。应用DDRT2PCR技术有望找到调控肿瘤转移的基因,为肿瘤的诊断和治疗提供新的线索。

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玫瑰组织培养研究进展

[摘 要]玫瑰组培苗已投入大规模生产中,已取得显著经济效益。本文对玫瑰的组织培养进行了较为全面的综述。目前,玫瑰采用根、茎、叶片、叶柄、茎尖、原生质体、合子胚、花药、花萼、花托、腋芽进行组织培养取得成功;主要采用MS培养基,添加低浓度的激素BAP03~05mg/L,NAA0004~03mg/L或NAA或GA005~20mg/L诱导不定芽;在MS培养基中添加更低浓度的BAP和NAA进行壮苗;多采用低盐成份的MS培养基添加低浓度的NAA进行生根培养。[关键词]玫瑰;组织培养;研究进展组织培养技术是跨世纪的生物技术之一,应用于玫瑰快速繁殖,已带来巨额利润[1]。玫瑰称Rose,是蔷薇科蔷薇属植物,又称蔷薇、月季,园艺上统称现代月季。主要分布在北半球的温带和亚热带,是观赏价值极高的多年生灌木。我国的蔷薇属植物种类较多,目前栽培的园艺切花玫瑰品种主要来源于中国月季、厥蔷薇、黄玫瑰、欧洲玫瑰、香水月季、多花蔷薇、野玫瑰、光叶蔷薇等原种的种间杂交种[2],如拿破轮、玛利娜、卡尔红、索菲亚、贝拉米、坦尼克、雅典娜唐纳小姐、金奖章等。1 玫瑰组织培养的意义1.1 快速繁殖 玫瑰有性生殖能力差,大多观赏价

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【原创】MSP实验方案

大家好,课题是结肠癌甲基化方面,我想先把DNA ,RNA和蛋白质提取出来保存,以下是我的初步方案,请大家不吝指教,谢谢哦!RNA 抽提1. 匀浆处理将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10%2.将匀浆样品在室温(15~30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。3.每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。4. 4℃ 12000g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60%。5. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1mlTRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。6. 4℃ 12000g离心15分钟。离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。7. 移去上清。用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。8. 4℃ 7500g离心5分钟,弃上清。9.

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ABI推出的第一台声波聚焦流式细胞仪Attune™

相关专题 实验室的CT-流式细胞仪 2009年12月7日,来自美国加利福尼亚的消息——生命技术公司(纳斯达克代码:LIFE)旗下美国应用生物系统公司今日宣布它正式进入流式细胞仪 市场,首次推出Attune™ 声波聚焦流式细胞仪(Attune™Acoustic Focusing Cytometer),这是第一台用声波精确控制细胞移动的流式细胞计数系统。该公司凭借在仪器制造上的专长,再加上长期以来在流式细胞仪试剂上的领先供应商地位,创造出这种新技术新产品,让客户在一系列细胞生物学应用中得到更高的样品通量、灵敏度和准确性。 流式细胞仪的原理在于让细胞穿过激光检测设备,从而使科学家们得以对细胞进行计数和检测。每秒钟可计算数千个细胞的速度可实现对整个细胞群体的快速鉴定。流式细胞仪在细胞生物学领域的应用范围也在快速增长,包括细胞表达蛋白的研究(免疫 分型)、定量细胞中的DNA、细胞计数及其它。 Attune声波聚焦流式细胞仪可帮助科学家们实现对细胞群体中大量异质细胞进行统计学数据的采集,以便研究包括大小、复杂性、表型和健康情况

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真核基因表达调控

1、真核基因组的复杂性与原核生物比较,真核生物的基因组更为复杂,可列举如下。(1)真核基因组比原核基因组大得多,大肠杆菌基因组约4×106bp,哺乳类基因组在109bp数量级,比细菌大千倍;大肠杆菌约有4000个基因,人则约有10万个基因。(2)真核生物主要的遗传物质与组蛋白等构成染色质,被包裹在核膜内,核外还有遗传成分(如线粒体DNA等),这就增加了基因表达调控的层次和复杂性。(3)原核生物的基因组基本上是单倍体,而真核基因组是二倍体。(4)如前所述,细菌多数基因按功能相关成串排列,组成操纵元的基因表达调控的单元,共同开启或关闭,转录出多顺反子(polycistron)的mRNA;真核生物则是一个结构基因转录生成一条mRNA,即mRNA是单顺反子(monocistron),基本上没有操纵元的结构,而真核细胞的许多活性蛋白是由相同和不同的多肽形成的亚基构成的,这就涉及到多个基因协调表达的问题,真核生物基因协调表达要比原核生物复杂得多。(5)原核基因组的大部分序列都为基因编码,而核酸杂交等实验表明:哺乳类基因组中仅约10%的序列为蛋白质、rRNA、tRNA等编码,其余约90%的序列功能至

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免疫球蛋白IgG的提取分离纯化

一、材料与试剂配制 1.动物血清 2.硫酸铵饱和溶液:硫酸铵800g~850g,H 2 O1000mL 加热至绝大部分溶质溶解为止,趁热过滤,置室温过夜,然后以28%NH 4 OH调pH至7.0(不调pH值也可以)。注:硫酸铵以质量优者为佳,因次品中含有少量重金属对蛋白质巯基有影响。如次品必须除去重金属,可在溶液中通入H 2 S,静置过夜后滤过,加热蒸发H2S即可。 3.0.01Mol/LpH7.4PB液: A液:0.10Mol/LNaH 2 PO 4 液 NaH 2 PO 4 •2H 2 O15.60g加H 2 O至1000.mL B液:0.10Mol/LNa 2 HPO 4 液 Na 2 HPO 4 •12H 2 O35.80g加H 2 O至1000mL 取A液19mL,B

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