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固有类淋巴细胞NKT细胞的特性与分类

固有类淋巴细胞 NKT 细胞的特性 NKT细胞是一群细胞表面既有T细胞受体(TCR)又表达NK细胞受体的固有类淋巴细胞。 (1)经典NKT细胞为CDl+和CD4-CEB-(DN),表达常见的NK标记如小鼠NKl.1抗原和Ly49受体。其中NKl.1是NKR-P1家族中的一个成员(NKR-P1C),但对人只鉴定出NKR-P1A(CDl61)。NKl.1分子胞外部分属C型凝集素超家族。以同源二聚体形式表达。非经典NKT细胞一般为CD8+,可在NKT细胞缺陷的Ja281-/-小鼠或CDld-/-C57BL/6小鼠旰脏中检出,而在除胸腺外的其他淋巴器官中无法检出。CD8+NKT细胞广泛表达抑制性受体Ly49。 (2)作为固有类淋巴细胞,NKT对TCR基因片段的取用显示高度的限制性(restrictedusage),造成TCR库向特{方向偏移(biasedrepertoire)。小鼠中TCR由Val4Jol8形成CDR3,称作VM4iTCR,或VM4i NKT细胞。V=14iXKT细胞也可偏移性表达Vp8.2V137或者Vp2。V=14iNKT细胞不表达CD8分子,通常是C

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离心分离方法

(一)差速离心法它利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,沉降速度不同,通过不断增加相对离心力,使一非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。操作过程中一般是在离心后用倾倒的办法把上清液与沉淀分开,然后将上清液加高转速离心,分离出第二部分沉淀,如此往复加高转速,逐级分离出所需要的物质。差速离心的分辨率不高,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,常用于其他分离手段之前的粗制品提取。(二)速率区带离心法速率区带离心法是在离心前于离心管内先装入密度梯度介质(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等),待分离的样品铺在梯度液的顶部、离心管底部或梯度层中间,同梯度液一起离心。离心后在近旋转轴处(X1)的介质密度最小,离旋转轴最远处(X2)介质的密度最大,但最大介质密度必须小于样品中粒子的最小密度,即ρP>ρm。种方法是根据分离的粒子在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区带,达到彼此分离的目的。梯度液在离心过程中以及离心完毕后,取样时起着支持介质和稳定剂的作用,避免因机械振动而引起已分层的粒子再混合。由于ρP>ρm可知S>0,因此该

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阴道分泌物常规检查(直接涂片法)

1原理本实是利用阴道分泌物的生理盐水涂片在显微镜下观察分泌物中是否有阴道毛滴虫、念珠菌等并根据所含白细胞(或脓细胞)、上皮细胞、杂菌的多少,把其清洁度分成Ⅰ~Ⅳ度。2标本采集2.1标本采集前病人准备:在采集标本前24小时内应无性交、无盆浴、无阴道灌洗、近期内未服用激素类药物。2.2标本种类:阴道分泌物2.3标本要求:用无菌棉拭子从阴道后穹隆处取分泌物;所用窥阴器不可用润滑剂,只能用少量无菌等渗盐水润湿。3标本储存:取材后应立刻查,避免因放置时间太久影响滴虫的活动性或虫体受到破坏使查结果受到影响。4标本运输:一般室温运输,如冬季气温较低应注意标本的保温运输。5标本拒收标准:无盐水干结标本。6操作步骤6.1将采集标本的拭子直接涂在滴有盐水的载玻片上,盖上盖玻片。6.2用低倍镜观察有无阴道毛滴虫、念珠菌菌丝等。6.3再用高倍镜观察白细胞、上皮细胞、杆菌、球菌的多少,并寻找有无念珠菌菌体及其孢子。7结果判断与分析7.1阴道涂片清洁度的判定7.2阴道毛滴虫呈梨形,比白细胞大2倍,顶端有鞭毛4根,在25~42℃温度下可活动。7.3在高倍镜下见卵圆形孢子或假菌丝与出芽细胞相连接,成链状及分枝状。

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有关封闭抗体检测的知识点

封闭抗体(Blockingantibodies,BA)是人类白细胞抗原(HLA),滋养层及淋巴细胞交叉反应抗原(TLX)等刺激母体免疫系统,所产生的一类IgG抗体。研究认为,孕妇血中BA可以表现以下作用:(1)BA中和同种异体抗原,而不使胎儿受到排斥:(2)抗体直接作用于具有免疫功能的细胞如:CTL细胞,NK细胞等:(3)直接结合到靶细胞的抗原上,从而降低他们对对受体细胞参与的免疫反应的敏感性。以往研究认为,反复自然流产的发生与母体缺乏BA有关,流产次数越多的患者,其体内BA缺乏的可能性越大。BA的产生不足,母体对胎儿产生的强烈排斥现象,发生于孕早期可出现反复自然流产,孕晚期则可出现妊娠高血压疾病,胎儿宫内生长受限,甚至出现胎死宫内。因此对反复流产患者进行BA检测是非常有必要的。封闭抗体Blockingantibodies酶联免疫(EIA) 参考范围:该项目检测结果对不同人群意义不一样,详情请咨询医生。 样本血清/血浆0.4ml室温:8小时冷藏:7天冷冻:1月标本要求:标本应无严重溶血,脂血,黄疸,无微生物污染;不满足上述要求的标本拒收,标本的采集应使用清洁,无菌的一次性的干躁

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人类基因组DNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析

相关专题 成功走出第一步:DNA提取 实验目的: 1.熟悉分子 生物学实验的操作特点。 2.掌握人类基因组DNA提取 的基本原理。 3.熟悉人类基因组 DNA提取的基本方法。 4.熟悉琼脂糖凝胶电泳的原理和操作。 实验原理: 用细胞裂解液裂解细胞膜,收集细胞核,加入SDS破裂核膜,用蛋白酶K使核蛋白降解成小片段并从DNA上解离下来,经苯酚﹑氯仿抽提去除蛋白质,无水乙醇沉淀DNA,75%乙醇洗涤DNA沉淀,真空干燥后,溶解于TE中即得到高分子量的DNA。 本次实验使用的试剂盒系直接加入裂解液裂解细胞后,用蛋白酶K使核蛋白降解成小片段并从DNA上解离下来,并使用RNaseA降解RNA,再利用特殊硅基质膜吸附DNA的特性,可快速、高效地纯化回收基因组DNA。 操作步骤: 细胞裂解与RNase/蛋白酶K 消化 1. 取100 μl抗凝全血置于1.5ml Eppendorf离心管中,再加入100 μl裂解液和20 μl RNaseA/蛋白酶K液,用移液器来回吹打混匀,室

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间接法免疫荧光组织化学染色步骤

间接法免疫荧光组织化学染色步骤 1.检测抗原法以单层细胞培养标本为例介绍此法的染色步骤: (1)取出细胞贴附生长的小盖片,用预热的PBS冲洗2次; (2)4%多聚甲醛(或冷丙酮)固定5~10分钟,晾干; (3)0.01MPBS(pH 7.4)漂洗3次,每次5分钟。 (4)0.3%Triton X-100孵育,室温20分钟,PBS漂洗2次(细胞膜抗原可省略此步骤); (5)非免疫血清(或15%小牛血清)孵育,室温10分钟; (6)滴加特异性一抗(如小鼠抗大鼠波形蛋白单克隆抗体,l:200稀释度),4℃过夜或37℃孵育30分钟,BS漂洗3次,每次5分钟; (7)滴加与第一抗体种属匹配的荧光素标记二抗(如羊抗小鼠FITC-IgG。1:100),37℃避光孵育30分钟,PBS漂洗3次,每次5分钟; (8)Hoechst 333442复染细胞核15~20分钟(不是必需步骤); (9)甘油磷酸缓冲液封片,荧光显微镜下镜观察; (10)结果分析:波形蛋白免疫反应阳性细胞胞质呈现绿色荧光,如细胞核复染后可呈现亮蓝色荧光。阴性细胞仅见细

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免疫胶体金的制备及其在医学检验中的应用

胶体金是一种常用的标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。1971年Faulk 和Taytor将胶体金引人免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。 免疫胶体金技术的基本原理氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强

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植物细胞的活体染色与死活鉴定

【原理】活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染料之一,它是一种弱碱性pH指示剂,变色范围在pH6.4~8.0之间(由红变黄)。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,由于液泡在一般情况下呈酸性反应。因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色,在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色;死细胞由于原生质变性凝固,胞液不能维持在液泡内。因此,用中性红染色后,不产生液泡着色现象。相反,中性红的阳离子,却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合,而使原生质与细胞核染色。【仪器与用具】显微镜;小培养皿;载玻片;盖玻片;单面刀片;尖头镊子;酒精灯;火柴;擦镜纸;吸水纸适量。【试剂】0.03%中性红溶液;1mol/L硝酸钾溶液。【方法】1. 选用洋葱鳞茎(或大葱假茎基部)及小麦叶片作材料。2. 切下一片较幼嫩的洋葱鳞片,用单面刀片在鳞片内侧割划成0.5cm2左右的小块,用尖头镊子将内表皮小块轻轻撕下,即可投入中性红溶液染色(注意应将表皮内侧向下)。若用小麦叶片为材料,可将叶片背面朝上平放在载玻片上,再将此载玻片放入盛有少量清水

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荧光PCR原理

荧光染料荧光基团通常各自拥有单一的光吸收峰。在光的刺激下,荧光基团吸收光的能量后通常以三种方式释放出能量:一、光能:许多荧光基团吸收光能后仍旧以光能形式释放能量,并且发射光的峰值大于吸收峰。比如荧光染料Fam的光吸收峰为490nm,而发射峰为530nm。二、热能:某些荧光基团吸收光能后,能量转换为热量扩散到环境中,如Dabcyl。三、转移给临近的分子:当临近的分子满足发生能量转移的要求时,能量从荧光基团传递到临近的分子。荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET) 当某个荧光基团的发射谱与另一荧光基团的吸收光谱发生重叠,且两个基团距离足够近时,能量可以从短波长(高能量)的荧光基团传递到长波长(低能量)的荧光基团,这个过程称为荧光共振能量转移(FRET),实际相当于将短波长荧光基团释放的荧光屏蔽。荧光PCR 荧光PCR不同于其他PCR的地方在于PCR过程中利用荧光染料在光刺激下释放的荧光能量的变化直接反映出PCR扩增产物量的变化,荧光信号变量与扩增产物变量成正比,并通过足够灵敏的自动化仪器实现对荧光的采集和

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ProcartaPlex™ 多因子免疫检测

以更少量的样本完成对更多生物标志物的分析。由卓越的免疫试剂供应商开发,用于 Luminex® 平台,ProcartaPlex 使您可以在 25-50μL 的样本(血浆、血清、细胞培养上清液以及其他体液)。实现在 25-50μL 的样本中同时对多达 50 种因子进行检测与定量。该技术在多通道「类 ELISA」分析中,为每种靶标使用了经不同染色处理的捕获微球。相比于传统的三明治 ELISA 而言,ProcartaPlex 免疫分析可以在使用样本量少而时间相同的情况下,分析多达 50 倍数量的因子。 ProcartaPlex 多通道免疫分析提供了多种试剂盒类型,涵盖六个物种(人类、小鼠、大鼠、非人灵长类、猪以及犬类),从而满足您的研究需求。 ● ProcartaPlex Panels 多因子试剂盒 预先搭配好的、生物学相关且以疾病定义的试剂盒。使用磁微球来对单一样本中多达 50 种因子进行定量的多通道分析。 ●ProcartaPlex 单因子试剂盒 用于检测单一因子的产品,可用于另外添加到多因子试剂盒。或者,也可将多个单因子试剂盒组合起来,并搭配使用 ProcartaPle

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弥散性血管内凝血(DIC)的输血治疗

弥散性血管内凝血(disseminatedintravascularcoagulation,DIC)是以血管内凝血系统激活,导致血管内纤维蛋白沉着为特征,伴发继发性纤溶或纤溶受抑的综合征;它是多种严重疾病的一个中间病理环节,临床上常表现为严重的出血、器官功能障碍、微血管栓塞、微血管病性溶血性贫血及原发病的临床表现。DIC不是一个单独的疾病,而是一种复杂的病理生理过程和严重的获得性出血综合征,若不及早诊断和治疗,病死率极高。目前DIC的治疗原则包括:生命体征支持措施、尽量消除引起DIC的病因原发病、抗凝治疗与补充治疗[补充新鲜冰冻血浆(FFP)及冷沉淀物等] 治疗DIC首先要控制诱发DIC病理反应的原发病,控制出血和血栓是DIC治疗的重点。采取正确的治疗方案不但可以提高存活率,而且可以预防器官缺血性损伤。由于DIC凝血系统激活,广泛的血管内凝血使大量血小板和凝血因子被消耗,导致严重出血或血管内溶血引起贫血,因此必须补充相应的血液成分。一般在DIC低凝状态时应在病因治疗和抗凝治疗的基础上及时补充被消耗的血小板及凝血因子[1],使其恢复或接近正常的止血水平。 1、全血:全

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胶体金的研发思路

前段时间写过一个胶体金的市场情况,考虑到丁香园里做研究或者研发的战友会比较多一些,结合自己的研发经验,写一些相关的东西。 一, 做胶体金研究好出论文吗? 相对分子生物学的微观研究,胶体金出论文的难度似乎很大,总觉得一个研究做下来,就是出线与不出线,没什么可以写。为什么? 首先,胶体金研究偏向生物技术应用研究,而分子生物学目前阶段还是停留在理论研究。所以你可以通过一些色带、测序结果等告诉别人,你发现什么什么特殊的位点,一个新的发现就是一篇论文且有固定的套路,但实际产业转化应用意义目前不是很大。而胶体金在于应用,深层次的理论技术研究被掩盖,但没有固定的可套用模式,实际上要解决的问题很多空间很大,且研究结果可立即转化产生利润。 其次,写什么,怎么写?一般有课题论文、技术攻关论文、硕士毕业论文几种情况。 课题论文,包括行业内快速检测模型的建立(如兽病快速检测模型,其中可以包括犬细小、口蹄疫、禽流感等)、快速检测试纸标准化的研究。 技术攻关论文,某类产品共同问题的解决(如人全血检测中假阳性的消除方法研究等)。 硕士毕业论文,某个具体产品的研究。

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苔藓植物门(Bryophyta)

一、目的要求 通过对代表种类的观察,掌握藓纲植物的形态、构造、生活史,了解不同的生活型。 二、实验材料 葫芦藓属、金发藓属等十几个属的配子体,生活的原丝体,孢蒴纵切、孢子体、精子器纵切。 三、实验内容和方法 1.取葫芦藓(Funaria)配子体和孢子体,观察下列内容 : (1) 配子体形态:矮小,高约1—3cm,直立生长,叶长卵形,一层细胞厚,具中肋,在茎上螺旋排列。茎的下端具有单列细胞的假根,有分枝。 (2) 孢子体形态:孢子体着生在雌枝顶端,由合子萌发形成,2n。分为基足、蒴柄和孢蒴三部分。基足为一团薄壁细胞,埋于雌枝顶部的组织中,外表看不到。蒴柄细长柱状,上部弧形下弯。孢蒴着生在蒴柄顶端。孢蒴是特殊的孢子囊,结构较复杂。取一孢蒴在实体显微镜下解剖观察下列结构:   蒴帽:孢蒴顶部的帽状物,是颈卵器的一部分(n)、孢蒴成熟后往往脱落。   蒴盖:在蒴帽下面,成熟时黄褐色,圆碟形,其边缘有环带的分化。   蒴齿:用刀片纵切孢蒴,在蒴壶的开口部可看到二轮蒴齿,外齿层长,内齿层短。   蒴壶:是孢蒴的主体结构,葫芦形,

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如何区分细胞周期中的细胞与凋亡中的细胞?

在做细胞培养时,大家 会分不清浓缩核,比如分裂后期、分裂末期的核。有时候会误认为是凋亡,所以有必要分清楚。一般认为最大的区别是分裂后期的核是浓染的,但是通常都是成对的或对称的。hoechst,AO/EB染色均能明显显示这个特征,下面是一些细胞周期的片子 ,hoechst 染色中也能看到。Subsequent stages of the cell division cycle. Histone H2B was tagged with green fluorescent protein (GFP). This made it possible to obtain fluorescence confocal microscopy images of chromatin.Interphase nucleiProphase nucleiAnaphase nucleiAnaphase nuclei这个最容易唬人了。下面是S期细胞比较多的时候让我们来看一下二者的机理第一,细胞凋亡 的机制第二,细胞周期的机理G1期的信号转导机制G2/M期的信号机制细胞周期中信号的级联过程的模式图细胞周期的经验模式图

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我国临床实验室质量管理的基本要求

卫生部临床检验中心 申子瑜 多年来临床检验质量一直是检验工作者关注的核心问题,如何做好临床实验室的质量管理,特别是在与国际临床实验室质量管理模式接轨的同时,提出适合于我国经济发展现状、适合我国国情的实验室基本资格要求、适用于不同级别临床实验室的质量管理方案已成为我们面临的重要任务。 根据国际标准化组织ISO 15189:2003《医学实验室-质量和能力的专用要求》中的定义,以诊断、预防、治疗人体疾病或评估人体健康提供信息为目的,对取自人体的材料进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生理学、细胞学、病理学或其它检验的实验室统称为临床实验室(以下简称实验室),也称之为医学实验室。 针对临床实验室质量管理,一些发达国家和国际组织已经出台了一些法律和标准供我们借鉴。美国国会于1967年就通过了专门针对临床实验室质量管理的法律,即临床实验室改进法案(Clinical Laboratory Improvement Act 1967,简称CLIA 67)。在实行此法案20年后,1988年又通过了对CL

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急性肾功能衰竭

佚名 急性肾功能衰竭(acute renal failure)是各种原因引起肾脏泌尿功能急剧降低,以致机体内环境出现严重紊乱的临床综合症。临床上主要表现为氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒,并常伴有少尿或无尿。 一、急性肾功能衰竭的原因与分类 根据发病原因可将急性肾功能衰竭分为肾前性、肾性和肾后性三大类。 (一)肾前性急性肾功能衰竭 肾前性急性肾功能衰竭是由于肾脏血液灌流量急剧减少所致,常见于休克的早期。此时,有效循环血量减少和血压降低除直接导致肾血流量减少外,还可通过交感-肾上腺髓质系统和肾素-血管紧张素系统使肾脏小动脉强烈收缩,从而进一步降低肾脏血液灌流量和有效滤过压。故GFR显著减少。同时,继发性醛固酮和ADH分泌增多,又可增强远曲小管和集合管对钠、水的重吸收,因而尿量显著减少,尿钠含量低于20mmol(mEq)/L,尿比重较高。GFR的急剧减少,还可引起高钾血症和酸碱平衡紊乱。 由于肾前性急性肾功能衰竭时尚无肾实质的器质性损害,故当血容量

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干燥机操作机理

一、 真空耙式干燥机 真空耙式干燥机是一种传导传热干燥器。物料不直接与加热介质接触,适用于干燥少量的、不耐高温和易于氧化的泥状、膏状物料,含水率为15%~90%。干燥器内水平耙式搅拌器的叶片是由铸铁或钢制成,安装在方形轴上,一半叶片方向向左,另一半向右。轴的转速为7~8r/min,它是由带减速箱的电机带动。同时采用自动转向装置,使轴的转动方向、在每隔5~8min改变一次搅拌器的转动方向。操作时,先开动搅拌器,加入被干燥的物料,并将加料口关闭。同时通入蒸汽加热,加热蒸汽的压力一般为0.2~0.4Mpa(表压)。用真空泵抽出水蒸汽和不凝气体,一般物料干燥时,真空度约为700mmHg。这种干燥器的水分蒸发强度,随物料性质、湿度、加热蒸汽压力及真空度等的不同而异。例如,在真空度为700mmHg,加热蒸汽压力为0.2Mpa(表压)时,将马铃薯淀粉从初水分为40%干到20%,干燥机的水分蒸发强度为5~7kg/m2.h。真空耙式干燥机的操作比箱式干燥器的劳动强度低,能回收物料中的有用湿分,操作条件好,管理比较方便。其缺点是生产能力低,设备结构比较复杂,搅拌器叶片易损坏等。这种干燥器在染料和医药工业

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模式生物——小鼠

小鼠(mouse) ——学名:mus musculus,在 生物 分类学上属脊椎动物门、哺乳动物纲、啮齿目、鼠科、鼷鼠属、小家鼠种。 A、近交系(inbred strain): 1)BALB/c小鼠 形成了许多亚系,如BALB/cAnN, BALB/cJ,BALB/cCd。BALB/c小鼠基因型为Aundefined*c。毛色为白色。其乳腺癌发病率低,但对致癌因子敏感。乳腺肿瘤发生率约为10﹪~20﹪。有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤、白血病的发生。 肺癌发病率雌性26﹪,雄性29﹪。白血病发病率雌性12﹪,雄性10﹪。血压与其他近交系小鼠相比为最高,有自发高血压症。老年小鼠心脏有某些病变,雌雄小鼠常有动脉硬化。 几乎全部20月龄的雄性小鼠均有淀粉样变。对鼠伤寒沙门氏菌C`5敏感,对麻疹病毒中度敏感,易患慢性肺炎,对放射线极度敏感。富于网状内皮细胞的器官(如肝、脾)与体重相比,所占比值很大。常用于单克隆抗体和免疫学研究。 BALB/c小鼠生产性能好,繁殖期长,一般无相互侵袭习性,比较容易群养。平均寿命:有的记载雄鼠为509天,雌鼠为561天;有的记载雄鼠

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E.coli启动子与σ因子的关系

相关专题 E.coli 细胞中主要的σ因子可与核心酶一同被纯化,称为σ70,但菌细胞中另外有一些σ因子能够识别其顺序与E.coli的主要启动子不同的另一些启动子,并促使核心酶起始转录。这些变异的σ因子在细胞中有特别功能,通常能剧烈改变细胞RNA的合成方式,以便在需要时使一组全新的基因得以表达。这是在枯草杆菌(Bacillus subtilis)中首次发现的,它们的作用是开启在芽胞形成(sporulation)过程中需要的一整套新的蛋白质的表达。噬菌体往往有其自己的σ因子,借以在噬菌体发育的某一特殊阶段开动其所需要的某些噬菌体基因的转录。 在E.coli 中共有17个热休克基因,基因表达有赖于转录改变。基因htpR是其主要调节器,是转到热休克反应所必需的。hrpR的产物是一个32KD的蛋白质,它就是一种变异的σ因子,称为σ32。而将正常的σ因子称为σ70(表示其分子量为70KD)。然而σ32很不稳定,故调控它的表达状况就可以使其量迅速增多减少。σ32能引导核心酶在热休克基因的启动子处起始转录。这些启动子的顺序与正常的共同顺序是不同的。特别是其-1

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石蜡切片的异常及处理

异常表现 原因和处理方法 切片纵裂或纵断 1、 刀刃损,须磨、鐾。 2、刀口粘附细丝维,须擦净刀口。 3、组织内有细小过硬异物或骨质等。剔除异物,骨质脱钙。 切片弯曲或滚卷 1、刀钝须磨或鐾。 2、刀的倾角过大,调整。 切片厚薄不均,宽窄相间,或在每张切片上有厚薄区带 1、切片机调整螺旋须紧固。 2、组织过硬,需用软化剂处理,湿润组织切面,稍冰冻,均匀而慢切。 3、刀的倾角过大,须调整。 切制时组织破碎 1、刀钝,须磨。 2、蜡太软,须用冰块处理蜡块切面。 3、蜡内形成冰晶,凝固时冷却得慢或含水及透明剂,须重新脱水。 4、温度过高使组织变硬变脆,先用温水浸润而后切。若有过多的胶质,则可浸入 70% 酒精甘油软化后切片。 切片带呈弧形弯曲 1、组织形状不规则,蜡边缘区不平行并与刀刃不平行。 2、由于阻力不同,切片带组织内成分复杂,向阻力小的方向弯曲,修蜡块应视组织情况将蜡块切修成倒梯形,阻力大的一侧窄些,小的一侧宽些。 3、切片过厚,刀角偏大,刀钝须磨或鐾调整厚度及刀角,选择锋利处切片。 组织压缩,切片变窄,切片周围蜡边粘连使皱褶不易展开。 1、蜡块被压缩,系由于刀刃斜面不平,须研磨、

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