1、使用方法：(1)将材料片放在载物台上。(2)开启荧光显微镜稳压器，然后按下启动组点燃紫外灯15min内不得关闭，关闭后3min内不得再启动。(3)将激发滤光片转至v，分色片调到v，选用495或475nm阻挡滤光片。(4)选用uvFL40、uvFL100荧光接物镜镜检。(5)在玻片上加无荧光油，先用40x，再用100x调焦镜检，呈现荧光。(7)因荧光物质受紫外光照射时随时间的增长荧光逐渐变弱，因此镜检时应经常变换视野。(8)亦可用uvFL10或uvFL20低倍镜镜检材料（用低倍镜时不加无荧光油）。2、荧光图像的记录方法： 荧光显微镜所看到的荧光图像，一是具有形态学特征，二是具有荧光的颜色和亮度，在判断结果时，必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标，即凭工作者目力观察。作为一般定性观察，基本上可靠的。随着技术科学的发展，在不同程度上采用客观指标记录判断结果，如用细胞分光光度计、图像分析仪等仪器。但这些仪器记录的结果，也必须结合主观的判断。荧光显微镜摄影技术对于记录荧光图像十分必要，由于荧光很易褪色减弱，要即时摄影记录结果。方法与普通显微摄影技术基本相同。只是需要采用高速感光胶

为避免农业转基因生物对人类健康和生态环境的潜在不利影响，特对不同等级的基因工程工作制定相应的安全控制措施。1 实验室控制措施1.1 安全等级Ⅰ控制措施：实验室和操作按一般生物学实验室的要求。1.2 安全等级Ⅱ控制措施：1.2.1 实验室要求：除同安全等级Ⅰ的实验室要求外，还要求安装超净工作台、配备消毒设施和处理废弃物的高压灭菌设备。1.2.2 操作要求：除同安全等级Ⅰ的操作外，还要求：1.2.2.1 在操作过程中尽可能避免气溶胶的产生；1.2.2.2 在实验室划定的区域内进行操作；1.2.2.3 废弃物要装在防渗漏、防碎的容器内，并进行灭活处理；1.2.2.4 基因操作时应穿工作服，离开实验室前必须将工作服等放在实验室内；1.2.2.5 防止与实验无关的一切生物如昆虫和啮齿类动物进入实验室。如发生有害目的基因、载体、转基因生物等逃逸、扩散事故，应立即采取应急措施；1.2.2.6 动物用转基因微生物的实验室安全控制措施，还应符合兽用生物制品的有关规定。1.3 安全等级Ⅲ控制措施：1.3.1 实验室要求：除同安全等级Ⅱ的实验室要求外，还要求：1.3.1.1 实验室应设立在隔离区内并有明显警

一、扫描电子显微镜的工作原理 扫描电镜是用聚焦电子束在试样表面逐点扫描成像。试样为块状或粉末颗粒，成像信号可以是二次电子、背散射电子或吸收电子。其中二次电子是最主要的成像信号。由电子枪发射的能量为5～35keV 的电子，以其交叉斑作为电子源，经二级聚光镜及物镜的缩小形成具有一定能量、一定束流强度和束斑直径的微细电子束，在扫描线圈驱动下，于试样表面按一定时间、空间顺序作栅网式扫描。聚焦电子束与试样相互作用，产生二次电子发射（以及其它物理信号），二次电子发射量随试样表面形貌而变化。二次电子信号被探测器收集转换成电讯号，经视频放大后输入到显像管栅极，调制与入射电子束同步扫描的显像管亮度，得到反映试样表面形貌的二次电子像。二、扫描电镜的特点1.可以观察直径为0 ～30mm的大块试样（在半导体工业可以观察更大直径），制样方法简单。2.场深大（三百倍于光学显微镜），适用于粗糙表面和断口的分析观察；图像富有立体感、真实感、易于识别和解释。3.放大倍数变化范围大，一般为15 ～200000 倍，对于多相、多组成的非均匀材料便于低倍下的普查和高倍下的观察分析。4.具有相当高的分辨率，一般为3.5

（一）物化性状和用途黄白色粒状粉末，易吸收空气中水分和二氧化碳。密度：2.6，熔点：5960℃（分解），用于氧化剂、漂白剂、脱臭剂、防腐剂、医药品、水的精制、纤维的染色和印染以及矿石的处理等。（二）毒性对皮肤和粘膜的刺激性强，溶于水则能分解成氢氧化钠和过氧化氢，因此可认为强碱性引起的局部腐蚀为主要的毒作用。（三）过量暴露的影响粉尘对眼睛、皮肤和粘膜的刺激性强。（四）火灾和爆炸能与可燃物、有机物或易氧化物质的混合物形成爆炸性混合物，经摩擦或与少量水接触可导致燃烧或爆炸。可用干粉将火闷熄。禁止用水、泡沫和二氧化碳扑救。（五）化学反应性遇水剧烈反应，散发出氧和强热，并形成腐蚀性的碱溶液。（六）人身防护吸入：当空气中过氧化钠粉尘过高时，应戴防尘口罩。皮肤：使用手套、工作服和工作鞋，工作场所应备有可用的安全淋浴和眼睛冲洗器具。眼睛：使用防护眼镜与面罩。（七）急救吸入：使吸入粉尘的患者脱离污染区，安置休息并保暖。皮肤接触：先用水冲洗，再用肥皂彻底洗涤。眼睛接触：立即用大量水冲洗。口服：误服立即漱口、饮水，送医院急救。（八）储藏和运输储存于阴凉、干燥、通风处。防止受潮。与可燃物、有机物、易氧化物、酸

一、目的 1.了解ATP生物合成的意义。 2.掌握无机磷的测定方法。 3.掌握DEAE-纤维素薄板层析法测ATP的形成。二、原理 在适当条件下，酿酒酵母分解发酵液中的葡萄糖，释出能量，同时还利用无机磷，使AMP转变成ATP，一部分能量即贮存于ATP分子中。因此，在发酵过程中，可测得发酵液中的无机磷含量降低和ATP含量的上升。三、实验器材 1.酿酒酵母，新鲜酿酒酵母悬浮于蒸馏水中，离心，弃去上清液。如此用蒸馏水洗涤酵母数次，最后将洗净的酵母沉淀冷冻保存①。 2. AMP、 ATP标样 3.烧杯50 或100ml (1)。 4.电子分析天平。 5.水浴锅。 6.离心机4000rpm 7.722型（或7220型）分光光度计。 四、实验试剂 1.2%三氯醋酸溶液：2g三氯醋酸，溶于100 ml蒸馏水。 2.过氯酸溶液：0.8 ml过氯酸，加蒸馏水8.4 ml 3.阿米酚试剂：称取阿米酚[amidol,二氢氯化-2，4-二氨基苯酚，分子式： （NH4）2C6H3OH・2HCl]2g，与亚硫酸氢钠（NaHSO3）40g共同研磨，加蒸馏水200ml，过滤贮棕色瓶内备用。 4.钼酸铵溶液：

1、腹腔给药麻醉多用于大小鼠和豚鼠，较大的动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。2、戊巴比妥钠 狗、兔静脉缓慢30mg/kg ，腹腔给药40～50mg/kg ，常用浓度3% ，2～4小时中途加上1/5 量，可维持1小时以上。3、静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，立即停止注射。4、麻醉期间，动物的体温调节机能往往受到抑制，出现体温下降，可影响实验的准确性。此时常需采取保温措施。保温的方法有：实验桌内装灯，电褥，台灯照射等。5、用大动物进行实验时，防止动物中毒死亡，开始的剂量可采用鼠类的1/15～1/2，以后可根据动物的反应调整剂量。剂量太小，作用不明显，剂量太大，又可能引起动物中毒致死。一般说确定的给药剂量是指成年动物的，如是幼龄动物，剂量应减小。6 个月以上的狗给药剂量为1份时，3～6个月的给1/2份，45～89日的给1/4份，20～44日的给1/8 份，10～19日的给1/16份。7、狗的静脉注射多采用前肢外侧静脉或后肢外侧的小隐静脉。狗的生命力虽然顽强，但也不可“放心大胆的折腾”，因为戊巴比妥钠麻醉教强，很容易出现呼吸循环

原理 植物叶片的光合(呼吸)速率可以用单位叶面积，单位时间里同化(释放)C02的数量来表示。C02浓度可以通过红外线C02气体分析仪迅速测量。把植物叶片放入叶室。在开启气路中测定照光(或遮光)条件下叶室进出口之间的C02浓度差，就可以计算光合(呼吸)速率。 器材与试剂 器材：FS红外线气体分析仪测定光合(呼吸)速率装置，剪刀，橡皮泥，叶面积仪， 光量子计(或照度计)。 试剂：FS无水CaCl2 方法与步骤 1. 连接各部件，根据“红外线气体分析使用说明书”进行仪器调整，标定灵敏度。 2. 开启无油气泵，向空气贮气袋打入空气。待红外线气体分析仪预机数小时后，开启小气泵，向红外线气体分析仪通气，测定空气中CO-2浓度，并把记录笔移动到满量程的3/4处。 3. 把待测叶片20cm2左右(过大过宽的叶片可剪去二边，保留中脉)放入叶室，用橡皮泥封口。调节气体流量(1-2升/小时/cm2叶面积)，测定叶片在暗中因呼吸释放对气路C02浓度的改变量，即测定呼吸速率。 4. 开启光源，用光量子计(或照度计)测定叶室处光强。移动幻灯机与叶室间距离，或通过调节光源电压可调节实验所需要

(一)小鼠饲养管理的基本条件 饲养小鼠的基本条件包括鼠舍及笼具设备。由于前述小鼠的生物学特性及习性，小鼠对房舍的建筑和环境条件的要求比较严格，鼠舍应满足基本要求，如温度、湿度、噪音、氨浓度、通风换气和气流等条件。 笼具可采用瓦罐、塑料罐或塑料盒，按照体重20 g的小鼠计算，每只小鼠需要饲养笼具面积0.009～0.063 m2，最好是分为5～10只小笼饲养。非同窝的性成熟雄鼠放在一起时，易互斗并咬伤，所以已配过种的雄鼠应单独饲养。笼具上配以合适的上盖，上盖用金属网，网孔大小以逃不出仔鼠为原则。笼具上应配备饮水器具，以玻璃瓶或塑料瓶配以瓶塞组成，瓶塞中间打孔插入铝管或两端烧钝的玻璃管作为饮水管，饮水管的内径5～6毫米，外径7～8毫米。笼具内用清洁、干燥的小刨花或锯末作为垫料。笼具应摆放在鼠架上，以节约鼠舍空间。 (二)小鼠的饲料 小鼠的饲料，要求必须保持营养物质的平衡稳定，富含蛋白质，否则会影响生长发育、生产繁殖（如产仔数下降、不愿喂奶、嚼食仔鼠等）和抵抗疾病的能力（尤其在断奶时仔鼠死亡率高）。 小鼠对维生素、矿物质的要求也比较高，长期缺乏这些营养物质时，仔鼠生长缓慢

口服葡萄糖耐量实验（OGTT）在用于诊断及预测糖尿病方面已经越来越被临床所接受了。 （一）概述 1.糖耐量：指人体对摄入的葡萄糖具有很大耐受能力的现象。医学教育网|搜索整理 口服葡萄糖耐量试验：口服一定量葡萄糖后，每间隔一定时间测定血糖水平称之。 是一种葡萄糖负荷试验。利用这一试验可了解胰岛β细胞功能和机体对糖的调节能力。 2.OGTT的主要适应证 ①无糖尿病症状，随机或空腹血糖异常者； ②无糖尿病症状，有一过性或持续性糖尿； ③无糖尿病症状，但有明显糖尿病家族史； ④有糖尿病症状，但随机或空腹血糖不够诊断标准； ⑤妊娠期、甲状腺功能亢进、肝病、感染，出现糖尿者； ⑥分娩巨大胎儿的妇女或有巨大胎儿史的个体； ⑦不明原因的肾病或视网膜病。 （二）方法 WHO标准化的OGTT： WHO推荐成人75g葡萄糖，孕妇100g，儿童每公斤体重1.75g，总量≤75g用250ml水溶解，5分钟内口服。服糖前抽空腹血，服糖后每隔30分钟取血，共四次。采血同时每隔1小时留尿测尿糖。根据各次血糖水平绘制糖耐量曲线。 试验前三天每日食物中糖含量应不低于150g，维持正

家兔动脉血压的神经和体液调节 【目的】 本实验采用直接测量和记录动脉血压的急性实验方法，观察神经和体液因素对动脉血压的调节作用。 【原理】 在生理情况下，人和其它哺乳动物的血压处于相对稳定状态，这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦－主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射既可在血压升高时降压，又可在血压降低时升压，反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经，也称减压神经，易于分离和观察其作用。在人、犬等动物，主动脉神经与迷走神经混为一条，不能分离。反射的传出神经为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管纤维，心交感神经兴奋，其末梢释放去甲肾上腺素。去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的b受体结合，引起心脏正性的变时变力变传导作用，心迷走神经兴奋，其末梢释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，引起心脏负性的变时变力变传导作用，交感缩血管纤维兴奋时释放去甲肾上腺素，后者与血管平滑肌细胞

科学的宅男宅女可以盯着计算机，也可以老套点捧着纸质的科学期刊。 通过科学研究的刊物读原始论文和综述等文献，首先是学习的一步，是学术成长的必需；其后成为研究人员的日常工作的一部分，所谓活到老学到老对自然科学研究者来说不是例外而是常规，停止读文献之日基本是退出科学前沿之时。 读文献时，可以经常想其他人的文章与自己目前的研究能否有关系，也可以想文献对自己以后的方向的影响。经常这么要求自己可能从文献得到帮助，不过多数时候阅读文献并不一定马上有用，可能更多如儿童时代看故事书一般好玩，久而久之实际成为研究人员的生活习惯。 实验科学的研究人员，如果自己动手，时间最多的是花在做实验。对生命科学的人来说，研究生和博士后阶段都是自己做实验，而任助理教授以后，自己做多少实验因人而异，现实是做实验比较好的人最后一般也不做实验了，有些人误认为做了“老板” 不宜做实验，荒废了自己实验室最佳研究人员。英国传统提倡教授做实验，发育生物学的诺贝尔奖得主John Gurdon、分子生物学的诺贝尔奖得主Fred Sanger等皆一直自己动手做实验。Sanger的美国学生Gerald Rubin在休斯医

快速方便的染色步骤 SimplyBlue™ SafeStain的实验步骤易于操作，在不到3个小时的时间内就能完成，条带在染色液中马上可以显现，不需要脱色，但是为了达到最佳灵敏度，可以使用基于水的脱色步骤。 灵敏的染色结果 SimplyBlue™ SafeStain融合了独特的胶体状考马斯G－250染色液和一种优化的染色步骤，达到纳克级的灵敏度，1微克蛋白在染液中5分钟就可以检测到，使用额外的基于水的脱色可以检测到7ng蛋白（还原型BSA）。 下列样品在Nupage® Novex 4-12% Bis－Tris gel上分离，然后使用SimplyBlue™ SafeStain染色。 Lane1 : 6 µg protein mix Lane 2: 1 µg rabbit IgG Lane 3: 1 µg reduced BSA Lane 4: 5 µg E.coli lysate Lane 5: 20 ng reduced BSA Lane 6: 10 ng reduced BSA Lane 7: 7 ng reduced BS

RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(doublestrandsRNA，dsRNA)引起的，广泛存在于动物植物中的序列特异性转录后基因沉默过程，是生物体在进化过程中，抵御病毒感染及由于重复序列和突变引起基因组不稳定性的保护机制。Elbashir等[1]发现，一种称为短干扰或小干扰RNA(smallinterferingRNA，siRNA)的RNA干扰中间体，能在果蝇中导致mRNA的降解。这种iRNA为21个核苷酸，形成19bp的双链RNA分子，3′端有2个核苷酸突出(overhang)，可激活哺乳动物细胞的RNAi机制。1 RNAi的机制RNAi在哺乳动物中的机制基本上与果蝇和其他低等生物中RNAi的机制相似[2，3]。基本步骤由启动和效应步骤构成[4]，启动步骤为较长的双链RNA经过RNA酶Ⅲ核酸酶(Dicer)处理后，降解成21～23个碱基的siRNA，siRNA与靶mRNA有高度的序列特异性。siRNA在3′端有2个碱基突出。效应步骤为siRNA与RNA酶结合形成一个RNA诱导沉默复合体(RNA-inducedsilencingcomplex，RISC)，RISC是分子质量为50

相关专题 一、原理 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）普遍存在于动、植物 体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶，它催化下列反应： 2O +2H →H O +O 本反应产物H O 可由过氧化氢酶进一步分解或被过氧化物酶利用。 本实验依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除超氧阴离子自由基，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 二、材料、仪器设备 及试剂 （一）材料 水稻或小麦叶片。 （二）仪器设备 高速台式离心机，分光光度计 ，微量进样器，荧光灯（反应试管处照度为4000lx），试管或指形管数支。 （三）试剂 （1）0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）。 （2）130mmol/L甲硫氨酸（Met）溶液：

软件概述：SMART视频跟踪系统是一个系统完善，界面友好的评测实验室动物行为的视频跟踪系统。该系统可以对行为记录，轨迹，事件，社会交互行为，任务完成计算等方面提供一个范围广泛的分析参数。SMART视频跟踪系统利用实时图像或视频文件将动物的轨迹显示在计算机显示器上，然后在指定的区域中对轨迹进行分析。该系统以一个灵活的，易学的界面，可以进行如下的一些行为试验：Morris水迷宫，旷野试验，十字迷宫，辐射迷宫，住所依赖等。软件简介：SMART 视频跟踪系统是一个功能全面、易于操作的动物实验软件。它可以记录动物的活动、运动轨迹、事件、社交行为，并在大量参数的基础上计算数据。能实时地记录照片或视频文件，在电脑上显示动物的运动轨迹，并可以记录并计算动物在用户指定的区域内的活动路径等情况。应用：活动性检测： 运动活性、孔板测试、新奇物体测试、转圈行为等。焦虑性测试：开放式测试、高架式迷宫、O型迷宫、黑白测试。另外还有消沉性测试、学习记忆性测试、上瘾&奖励性测试、社交测试等。市场上最易于操作的视频跟踪产品：● 通过使用不同的步骤进行简单操作：标度、区域选择、探测设置、获取分析数据。● 将已记录

　　Northern印迹杂交是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。DNA印迹技术由Southern于1975年创建，称为Southern印迹技术。RNA印迹技术正好与DNA相对应，故被趣称为Northern印迹杂交，与此原理相似的蛋白质印迹技术则被称为western blot。Northern印迹杂交的RNA吸印与Southern印迹杂交的DNA吸印方法类似，只是在进样前用甲基氧化汞、乙二醛或甲醛使RNA变性，而不用NaOH，因为它会水解RNA的2’-羟基基团。RNA变性后有利于在转印过程中与硝酸纤维素膜结合，它同样可在高盐中进行转印，但在烘烤前与膜结合得并不牢固，所以在转印后不能用低盐缓冲液洗膜，否则RNA会被洗脱。在胶中不能加EB，因它为影响RNA与硝酸纤维素膜的结合，为测定片段大小，可在同一块胶上加标记物一同电泳，之后将标记物胶切下，上色、照像。样品胶则进行Northern转印，标记物胶上色的方法是在暗室中将其浸在含5μg/ml EB的0.1mol/L 醋酸铵中10min，在水中就可脱色。在紫外光下用一次成像相机拍照时，上色的RNA胶要尽可能少接触紫外

一. 影响免疫原性的因素（免疫原性基础） （一）抗原因素： 1.分子量：一般是分子量越大，免疫原性越强。 2.化学组成及结构： 蛋白质： A.氨基酸组成 --- 含芳香族氨基酸（特别是酪氨酸），免疫原性强； B.结构：环状，免疫原性强；直链，免疫原性弱。 多糖：具有免疫原性, 较蛋白质弱。 核酸：多无免疫原性。 3.可降解性： 含L-氨基酸的蛋白质易降解，具有免疫原性。 含D-氨基酸的聚合体不易降解，不具有免疫原性。 （二）宿主因素 1.异物性：异种或同种异体的物质。抗原来源与宿主之间种系关系越远，其免疫原性越强。 2.宿主的遗传性：同种动物不同品系及不同个体对同种抗原产生不同强度的免疫应答。 3.免疫原的剂量及进入途径： 剂量： （1）剂量不足或过多均不引起免疫应答。 （2）重复进入，引起强免疫应答。 途径：皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、口服 4.免疫佐剂（immunoadjuvant，adjuvant )定义：先于抗原或同时与抗原混合注射机体可增强抗原的免疫原性的物质。 应用：a.弱免疫原性物质 b.免疫原剂量不足 佐剂种类： (1)油

1.实验目的： 通过细胞的体外培养来检测产品的生物性能是否达到要求。 2.实验原理： 体外培养的细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。通过贴壁细胞的传代培养，观察细胞的生长状态可以反映出培养产品是否达到细胞培养的要求。 3.实验材料： 3.1 抽检样品： 3.2 细胞株：VERO细胞系：完全贴壁细胞，主要用于接种病毒的一种细胞。 3.3 实验试剂：RPMI1640(8111031)、0.25%胰酶（876536）、小牛血清（8187648）、都购自广州英韦创津生物试剂公司。 3.4 实验耗材：3ml的巴斯德吸管、酒精灯、镊子、酒精棉球。 3.5 实验仪器：XDS-1倒置显微镜购自广州粤显光学仪器科技有限公司； 超净工作台购自苏州净化仪器设备公司； 4.实验步骤： 4.1. 在倒置显微镜下观察细胞形态和密度，取生长良好的细胞若干瓶，

【实验原理】 盐析现象是指—般蛋白质在高浓度盐溶液中溶解度下降，故向其溶液中加入中性盐至一定浓度时，蛋白质即自溶液中沉淀析出。盐析作用与两种因素有关： ①蛋白质分子被浓盐脱水； ②分子所带电荷被中和。 蛋白质的盐析作用是可逆过程，用盐析方法沉淀蛋白质时，较少引起蛋白质变性，经透析或用水稀释时又可溶解。 盐析不同的蛋白质所需中性盐浓度与蛋白质种类及pH有关。分子量大的蛋白质(如球蛋白)比分子量小的(如清蛋白)易于析出。球蛋白在半饱和硫酸铵溶液中即可析出，而清蛋白需在饱和硫酸铵溶液中才能析出。 【 试剂 】 1.鸡蛋清的氯化钠溶液（一份鸡蛋清加10份的0.9%氯化钠溶液） 2.固体硫酸铵 3.10％氢氧化钠溶液 4..1%硫酸铜溶液 【实验操作】 1.取鸡蛋清氯化钠溶液约2ml于 试管 中，加入硫酸铵粉末，至硫酸铵饱和不再溶解为

丁香园网友roseluo425的观点为：1、0.08％胶原酶II＋0.125%胰酶等比混合后消化2、消化前后一定要轻柔吹打3、重悬时要充分吹打，动作轻柔（100次）4、种板密度要合适5、当然血清，板都要进口，别图便宜6、别忘了检查CO2温箱的情况丁香园网友ljm123的观点为：1、首先是选择乳鼠时最好是出生3天内的,以我的经验来看活力是较好的,皮肤看起来是暗红色的,再大一点的话,皮肤变厚,变白,不过也能养活,而且1个25CM2的培养瓶3只足够了.当然这里说的是SD的,昆明株的乳鼠就很难养活了,至少我做成功的次数很少,浪费了我不少时间.SD的差不多每次都会成功的.2、我用的是胰酶,0.1%,大概4只乳鼠要消化10左右,每次4-5分钟,不能时间长,虽然时间长了,消化的快些,但是接种后很难存活,听说过加了胶原酶会好些,不过我没试过,主要是因为它太贵了,我们买不起.消化过和中会出现絮状物我的感觉是消化可能有些快了。我的处理是如果样品足够多就可以将之丢去,样品少的话,可以先将所有的样品吸入另一新的离心管,重新在这个管字消化.将细胞悬液用5%血清培养液中止消化,而且一定得尽快中止.离心后再中止一次