原因可能有1泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理;2比例阀失效,更换比例阀即可。3泵密封垫损坏,更换密封垫即可。4溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法;5系统检漏,找出漏点,密封即可。6梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
① 必须是HPLC级的,不与固定相发生化学反应。② 对样品有适宜的溶解度,要求k在1~10范围内(可用范围)或2~5(最佳范围)。k值太小,不利于分离;k值太大,可能使样品在流动相中沉淀。③ 必须与检测器相适应。如用紫外检测器时,不能选用截止波长大于检测波长的溶剂。④ 粘度小。⑤ 必须脱气:由于流动相里含有微量空气,经泵的压力作用,会在流通池里产生气泡,这对分析产生一定的影响,如噪音增大,甚至于掩盖信号峰。因此,流动相在使用前必须经超声脱气30分 ...
1、溶剂过滤器是易碎品,切不可整体搬移,特别不能拿着夹子搬移2、过滤膜选择要选择合格产品,不合格的会溶进杂质,可用待过滤的溶剂浸泡24小时看有无溶解现象,以考察过滤膜质量。3、过滤膜分有机和水系,要区分开。4、水系过滤,有机用有机膜,最好过滤后再混合,混合后的流动相用哪个比例大用哪种膜。5、膜不分反正,但最好光滑一面向上,粗糟一面向下过滤效果会好。6、废弃过滤膜不要随意丢弃,过滤膜对环境有污染,不宜绛解。收集统一处理。7、 ...
一、开机前准备 1. 实验室温度应保持在15~30℃之间,湿度小于80%。2. 根据样品测试要求选择并连接合适的色谱柱、抑制器、检测器。二、开机1. 开启高纯氦气,使压力在3―4Mpa。按顺序开启泵电源、主机电源。2. 打开计算机,进入PeakNet MainMenu工作站系统。三、样品分析与采集数据 1. 双击PeakNet Run,在此界面上点File→Moldifly,选择合适的分析方法文件。点Baseline,仪器开始走基线。2. 基线平直后,用注射器把处理 ...
1、样品量不足:解决办法为增加样品量2、样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3、样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多:调整衰减即可。5、检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数6、检测器池窗污染:解决办法为清洗池窗。7、检测池中有气泡:解决办法为排气。8、记录仪测压范围不当:调整电压范围即可。9、流动相流量不合适:调整流速即可。10、检测器与记录仪超出校正曲线: ...
一、非极性1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷,商品名:AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1二、弱极性2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基(95%)二甲基聚硅氧烷,商品名:AC5,SE-52,3、5% Phenyl 1%vinyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基1%乙烯基(94%)二甲基聚硅氧烷,商品名:OV-5,DB-5 ...
根据柱污染程度可采取不同的方法来解决,如果污染不严重,污染物沸点不是太高,可通过老化来解决,但老化温度不可超过柱子的最高使用温度,且一般要较长时间(8―30小时),如果污染较严重,或通过老化仍不能使柱性能恢复,那就必须采用溶剂清洗,通常是用5倍柱容积的溶剂(如正戊烷,二氯甲烷等)通过色谱柱。当然,清洗溶剂用的越多,对柱性能的损坏越大,清洗完后,在通载气老化一定时间,如果柱性能恢复,便可继续使用。必须指出:只有交联柱才能清 ...
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查。3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动性)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;4、更 ...
一、开机前准备1.实验室温度应保持在10~30℃之间,一天内室温变化不超过±2℃,湿度小于80%。2.打开仪器主机门,检查仪器各部分是否正常,更换合适的电源、毛细管和检测器。检查仪器和记录仪连线是否正确。3.更换清洗毛细管用的超纯水和酸、碱溶液。二、开机打开毛细管电泳仪开关,打开记录仪开关。三、操作过程及数据输出1. 设置记录仪参数:输入当前日期和时间,对WIDTH、SLOPE、MIN AREA、DRIFT、LOCK、STOP TIME等 ...
一、混合溶剂必须要过滤以后才能混合,万一要混合后过滤的话,只能用有机的,绝对不能用水系的。因为水系的材料是纤维素,有机相回或多或少的溶解一点纤维素的,造成污染。二、标样或样品最好用流动相溶解(排除特殊情况),可以避免很多麻烦。三、给色谱柱加温,温度升高的目的,部分在于增加溶质的溶解度,但更重要的是降低溶剂的黏度,从而改进峰形和分离度。注意:温度升高会降低保留时间,这对分离度也有影响,温度的变化对谱带宽度的影响甚大,而塔 ...
样品处理是整个分析测试过程中的一个重要环节,其目的是利用各种化学方法将待测元素从固(液)态试样中定量地以离子形式转入测试溶液。选择合理的样品分解方法,可使分析手续大大简化,使分析方法的适应性、准确性大大提高。设计最佳样品处理的原则是:①保证样品中的被测元素全部定量地转入试液,即样品分解要完全;②避免样品处理过程中引入干扰元素,同时要有利于除去干扰元素;③分解方法要尽量简便,易操作,经济、迅速、安全,尽量减少对环境的污染 ...
一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病,用新注射器验证。2.未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值3.进样温度太低,检查温度,并根据需要调整4.柱箱温度太低,检查温度,并根据需要调整5.无载气流,检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速6.柱断裂,如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端,是可以补救的,切去柱断裂部分,重新安装二、前沿峰1.柱超载,减少进样量2.两个化合物共洗脱,提高灵敏度和减少进样量,使温度 ...
色谱峰拖尾的原因有很多,例如:1.色谱柱本身填装问题,筛板堵塞或填料塌陷;柱坏;2.柱头有污染;3.样品超载;4.样品溶剂不合适;5.柱外效应;6.化学或二次保留(硅羟基)效应;7. 缓冲容量不足或不合适;8. 重金属污染。解决方法如下:一、与化学有关的拖尾问题 ?1.流动相中,加入30mM的三乙胺(用于碱性化合物)或醋酸胺(用于酸性化合物), 未知化合物加醋酸三乙胺;2.如仍然拖尾,将三乙胺换为二甲基辛胺(或醋酸二甲基辛胺);3.降低进样量至《1μg ...
要分析和判断色谱仪的故障所在,就必须要熟悉气相色谱的流程和气、电路这两大系统,特别是构成这两个系统部件的结构、功能。色谱仪的故障是多种多样的,而且某一故障产生的原因也是多方面的,必须采用部分检查的方法,即排除法,才可能缩小故障的范围。对于气路系统出的故障,不外乎是各种气体(特别是载气)有漏气的现象、气体不好、气体稳压稳流不好等等,气路产生的“鬼峰”和峰的丢失较为普遍。另外,色谱柱的“老化”过程没有充分或柱温过高,产生的“ ...
一、峰丢失 可能的原因及应采用的排除方法 1.注射器有毛病,用新注射器验证。 2.未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值 3.进样温度太低,检查温度,并根据需要调整 4.柱箱温度太低,检查温度,并根据需要调整 5.无载气流,检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速 6.柱断裂,如果柱断裂是在柱进口端或检测器末端,是可以补救的,切去柱断裂部分,重新安装二、前沿峰 1.柱超载,减少进样量 2.两个化合物共洗脱,提高灵敏度和减少进样量,使温度降低10~20度,以 ...
一、 开机准备1、 检查气路和电路,确保正常。检查氮气、氢气发生器水位线不要超过上限水位线,也不要低于下限水位线。打开稳压器总开关。2、 打开全自动空气源开关、开关红色指示灯亮,仪器开始启动,在五分钟内压力表上的指针由0上升到0.4MPa,说明进入工作状态。(建议3个月更换一次过滤器内的活性炭,更换时内部不能有压力)3、将氮气发生器排空阀(在其后部上方的一铜制旋钮)取下,当空气压力达到0.4 MPa时,氮气压力已接近0.4 MPa时,再打开氮 ...
故障的类别 1、气路部分的故障:气体输入不正常,气体的种类不对或纯度不够、气路泄漏、气路堵塞、气路的污染、气路部件的故障、流量设置不当、色谱柱问题等; 2、主机电路部分故障:启动或初始化不正常、温度控制部分故障、键盘或显示部分故障、开关门不正常、量程衰减设置不当、其它功能性故障等。 3、检测器输出信号不正常:无信号输出、输出信号零点偏移、输出信号不稳定、输信号数值不对等; 4、其它故障:气源不正常、电网电压不正常、二次仪表不正常、机械类故障等。 ...
进样阀在进样过程中,必须是非常清洁的,否则得不到较好的结果。 进样阀切换到进样位置后(Inject),要在此位置上保持一段时间,使流动相充分冲洗样品定量管,这样可以保证有较高的精确度,而且不用另外再冲洗样品定量管。这种有色谱仪器控制的冲洗显然要比手动冲洗的更好些。 注意:冲洗需要的流动相体积至少为所进样品的10倍。例如,如果取20ul样品至100ul的定量管中,而流动相此时的流速为1ml/min,则需要在进样位置上至少保 ...
虽然蒸法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年,但是对于许多色谱工作者来说,它仍是一个新产品。第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的,并在八十年代初转化为商品,八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。此后,通过不断设计提高了ELSD的操作性能。现在ELSD越来越多的作为通用型检测器用于高效液相色谱,超临界色谱(SFC) ...
高效液相色谱的常见问题有:1、涡流扩散(Eddy diffusion) 流动相碰到较大的固体颗粒,就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀,有的部分松散或有细沟,则流动相的速度就快;有的部位结块或装直紧密则流就慢,多条流路有快有慢,就使区带变宽。因此,固相载体的颗粒要小而均匀,装柱要松紧均一,这样涡流扩散小,柱效率高。2、分子扩散 分子扩散就是物质分子由浓度高的区域向浓度低的区域运动,也称纵向分子扩散。要减少分子扩散就要 ...