表达β-半乳糖苷酶噬菌体的噬菌斑分析

材料：

LB或NZCYM顶层琼脂或琼脂糖，含有X-gal。对于3ml顶层琼脂，加40µl 2%X-gal。X-gal要在临用前才加入已冷却的顶层琼脂（47℃）中。

大肠杆菌铺平板细菌。只有不是β-半乳糖苷酶的过量表达株，可采用任何支持特异性λ噬菌体裂解生长的大肠杆菌。细菌染色体上单拷贝lacZ基因的存在不影响噬菌斑的检测。

方法：

1.  将λ噬菌体原种于SM+明胶液稀释。

2.  用10µl适当稀释的λ噬菌体感染0.1ml铺平板细菌。感染培养物37℃温育20min。

3.  用3ml含X-gal的已熔顶层琼脂（47℃）至第一个试管，通过轻拍或轻微涡旋振荡混匀，随后倒入至琼脂平板上。

4.  用剩下的噬菌体原种的稀释液重复步骤3。

5.  当顶层琼脂凝固后，将平板于37℃倒置培养15-18h。

6.  将平板哦成那个37℃培养箱中取出，再于室温下放置2h，然后记录噬菌斑的颜色。