人胃腺癌细胞MNK-45体内传代及接种实体瘤
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人胃腺癌细胞MNK-45体内传代及接种实体瘤的详细步骤:
1、收集对数增长期的MNK-45细胞若干瓶,制备成瘤细胞悬液undefined10^8个/ml左右接种到裸鼠胁部皮下。
2、待肿瘤生长到0.8g左右时,选择1-2只荷瘤(瘤块必须要求生长良好且无破损)裸鼠,颈椎脱臼处死,置75%酒精浸泡1-2分钟后裸鼠置超净工作台,于无菌条件下,剥取瘤块并将瘤块置200目细胞筛用玻璃棒研磨后用生理盐水或培养液冲洗。
并用1容器收集瘤细胞悬液,待吹打均匀后置10 ml离心管,1 000 r/min离心5 min,倾出上清,如此反复冲洗1-2次,然后用生理盐水或培养液适当稀释瘤细胞悬液,将肿瘤细胞数调到undefined10^8个/ml左右,接种到裸鼠胁部皮下。
3、下次传代重复第二步骤即可。此外,实验接种时也可用此法,不过应将接种细胞数适当减少。我个人认为用这种方法比用培养的细胞接种传代好。原因如下:A 接种后的肿瘤形成率高。B 用1-2只裸鼠,就可制备许多细胞悬液。C 省时省力。