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拟南芥叶片基因组DNA的提取

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一、材料和试剂

1. 乙醇

2. 异丙醇

3. 氯化钠

4. EDTA(乙二胺四乙酸)

5. SDS(十二烷基磺酸钠)

6. Tris,pH7.5

二、仪器

1. 研钵及研杵

2. 台式离心机(Eppendorf)

3. 振荡器(VWR)

三、步骤

1. 在1.5 mL 的离心管里加入400 mL Edward提取溶液。

2. 在加入提取液的离心管里将2-3片小叶或1片大叶用研棒磨碎(2-3周的植株)。

3. 振荡器上振荡5秒,室温放置直到其它准备工作准备完毕。

4. 室温16 000 rpm 离心2分钟。

5. 将300 mL 离心后的上清液转移到干净的离心管里。

6. 加入300 mL 异丙醇,混匀后室温放置2分钟。

7. 室温16 000 rpm 离心5分钟,去上清后用70%的乙醇洗沉淀,室温下干燥沉淀。

8. 100 mL 去离子水溶解DNA,贮存在–20°C冰箱里。

9. 吸取2-4 mL DNA溶液用于PCR反应。

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