微粒体的分离
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微粒体是一种脂蛋白所包围的囊泡,含核糖核酸、蛋白质和脂类。蛋白质中包括多种与糖类、脂类和蛋白质代谢有关的酶。通过甲基化或氢化作用,使药物修饰而解毒的酶也在微粒体内将。RNA存在于微粒体的小颗粒即核蛋白体中,分离微粒体的方法是利用分级离心方法,去掉细胞核、线立体后,经超速离心法而制备。
操作方法:
1.将体重约为300g饥俄20h后的大鼠断头,取出肝脏,洗涤,剪碎,加2倍体积
的介质(含0.15mol/L蔗糖,0.025mol/L KCl,0.1mol/L Tris -HCl pH7.4, 0.005mol/L MgCl 2 )溶液,在玻璃匀浆器中匀浆。
2.15,000g×10min离心,弃沉淀,取上清。
3.100,000g×60min离心,弃上清,取沉淀。
4.10,000g×20min离心,沉淀即为微立体。
5.将微立体保存在介质溶液中。
操作方法:
1.将体重约为300g饥俄20h后的大鼠断头,取出肝脏,洗涤,剪碎,加2倍体积
的介质(含0.15mol/L蔗糖,0.025mol/L KCl,0.1mol/L Tris -HCl pH7.4, 0.005mol/L MgCl 2 )溶液,在玻璃匀浆器中匀浆。
2.15,000g×10min离心,弃沉淀,取上清。
3.100,000g×60min离心,弃上清,取沉淀。
4.10,000g×20min离心,沉淀即为微立体。
5.将微立体保存在介质溶液中。