实验动物免疫方案

 

实验动物免疫方案

1 、抗原 : 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。

2 、免疫方式： 皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。

3 、不同动物免疫所需抗原量（以蛋白免疫为例）

>18-20kDa                  <18-20kDa

动物     抗原量    最佳抗原量     抗原量    最佳抗原量

兔子     20-200        100         50-400       200

小鼠     2-40          15           4-60         40

大鼠     10-50         30          20-150        50

绵羊    100-1000       200         200-1000      400

母鸡     20-200        100          50-400       200

单位：微克

4 、免疫方案（以免疫兔子为例）：

天数    0       14       28       38      56      66        87

注射    x        x        x                x

采血   2ml                        2ml           2+20ml     2+50-70ml

5 、注意：

1)第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合，以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原混合，采取多点，时间间隔式免疫法。

2) 如果用细胞免疫兔子，那么每次免疫所需细胞量为2-3 x 10⁷ cells。

3) 在连续免疫完三次后，需要少量取血进行ELISA检测，检测所免疫动物的抗体滴度，一般滴度能达到1:10,000-50,000。在处死所免疫的动物前一周应加强一次免疫。

4) 如果用小鼠免疫，可以尾静脉小量采血（大约50µl），最后取眼球大量采血（大约500-1000µl）；如果用兔子免疫，可以耳缘静脉小量取血(大约2mL)，最后心脏大量取血(50-100mL)

5) 按血清制备的标准方法将血清分离，并且分装成小份，储藏在-80^o C。