膀胱癌T24细胞传代
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我养的是膀胱癌 T24细胞(贴壁的)
心得如下:
1、 T24长的非常快,传代一般1:5传,每4天需要再传。
2、虽然是永生化细胞,也一定不要等细胞100%汇合再传代,多次这样细胞状态不好,球形增加,还不容易洗掉。
3、要用胰酶(0.25%)--EDTA(0.01%)混合消化液消化好些,一般1分钟内呈球形,即可混悬细胞了。
4、培养液用10%小牛血清的DMEM或1640都可以。
步骤:
吸净培养液, PBS洗2次,加消化液室温一分钟左右,要在显微镜下注意观察,不要过头,球形后,吸掉消化液,加1毫升培养液,吹打混匀,1:5传代。