IL-2质粒DNA探针制备的试剂与仪器
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IL-2 质粒DNA探针制备的试剂与仪器
(1)含IL-2 DNA探针的质粒以及宿主菌
(2)STE 溶液:0.1mol/L NaC1
(3)Tris HC1(PH8.0):10mmo1/L、1mmo1/L
(4)溶液I
50mmo1/L 葡萄糖
25mmo1/L Tris HCL(PH 8.0)
10mmo1/L EDTA(PH 8.0)
可配100ml,高压灭菌15min,贮存于4℃
(5)溶液II
0.2mo1/L NaOH(临用前用10mo1/L贮存液稀释)
1%SDS(配20%贮存液)
盖紧瓶盖,颠倒离心瓶数次,以充分混匀内容物,于室温放置5-10min.
(6)溶液III
5mol/L乙酸钾 60ml
冰乙酸 11.5ml
水 28.5ml
所配成的溶液对钾是3mol/L,对乙酸根是5mo1/L。
(7)含相应抗生素的LB增养基
(8)氯霉素(0.25g/2ml)→终浓度170μg/ml
(9)溶菌酶(10mg/ml,溶于10mm01/L Tris HCL PH8.0)1 ml
(10)无水乙醇(部分-20℃预冷),异丙醇,75%乙醇(部分4℃预冷)
(11)TE缓冲液(PH8.0)
(12)5 mol/L LiC1 1.5ml
(13)RNA酶
(14)3mol/L NaAC,
(15)饱和酚
(16)氯仿:异戊醇(24:1)
(17)质粒提取试剂盒(Promega:Wizard Minipreps DNA,NO117)
(18)低温高速离心机
(19)恒温摇床