脂肪酶的测活方法
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问:我在脂肪酶侧活方法上遇到很多问题,比如如何测定酸性脂肪酶的活性,发酵液的稀释倍数与酶活力并不成梯度,应该以哪个为最后的测定结果。谢谢各位战友的指教!
答:我测定的酶活的范围是数千到上万 IU/ml;测的时候用的NaOH溶液的摩尔浓度是 0.05 M, 这样的话根据酶活的定义最后的酶活公式就可以折算成IU/ml= undefined△V(样品和空白样的差值)n~A稀释倍数)。
滴定样品和空白样的差值一般控制在1~2 ml(据前辈的经验,能在线性范围内)。测样的时候一般是估计酶活能到达多少,将估计值除于10 就是稀释倍数。
如果碰到你这样的情况,我会尝试把NaOH溶液的摩尔浓度调到 0.005 M。不过我也不敢确定这么低的浓度会出什么结果。