腹水型肿瘤悬液的制备
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1 抽取腹水
选择接种后7－10d健康较好的动物，颈椎脱臼，固定于蜡板上，腹部皮肤消毒后，剪开并剥去腹部皮肤，用空针穿过腹部肌肉，抽吸腹水，放入无菌容器内，置冰块保存。若用几只动物供瘤时，应将腹水混合。另取小量腹水，置于加有肝素的干试管内，作为观察细胞形态及细胞计数用。将空针中剩余的腹水，滴一滴于载玻片上，推片，瑞氏染色，镜下进行细胞分类计数，其中瘤细胞数应≥95%。
抽出之腹水应为乳白色之浓稠液体，若为黄色或有大量红细胞数应弃去。
2 细胞计数
取置于肝素管内的细胞。用生理盐水稀释10倍及100倍；取稀释液0.9mL，加台盼蓝(0.2%台盼蓝生理盐水液)0.1mL，混匀。用白细胞计数法计瘤细胞总数。同时计算受感染的死细胞数。因瘤细胞死后，细胞膜的通透性改变，细胞可被台盼蓝染成蓝色。
3 接种
腹水用无菌含葡萄糖的平衡盐水(如Hanks氏液、Gey氏液、洛氏液、Earle氏液等)稀释至适当的浓度，作腹腔注射，每鼠注入0.1－0.2mL。整个操作应在60min内完成。
一般在试验结束后次日称体重，逐日记录。对照组动物通常在2－3周内全部死光，个别存活时间太长者需剔除，但各组亦应相应地剔除一只。如试验期间对照组动物于7d内死亡≥20%，表示试验失败。如对照组内20%动物存活4周以上，实验亦应作废，受试物组观察时间一般为60d(生存超过此时限者，仍按60d计算)。分别记录对照组和受试物组的平均生存时间。
选择接种后7－10d健康较好的动物，颈椎脱臼，固定于蜡板上，腹部皮肤消毒后，剪开并剥去腹部皮肤，用空针穿过腹部肌肉，抽吸腹水，放入无菌容器内，置冰块保存。若用几只动物供瘤时，应将腹水混合。另取小量腹水，置于加有肝素的干试管内，作为观察细胞形态及细胞计数用。将空针中剩余的腹水，滴一滴于载玻片上，推片，瑞氏染色，镜下进行细胞分类计数，其中瘤细胞数应≥95%。
抽出之腹水应为乳白色之浓稠液体，若为黄色或有大量红细胞数应弃去。
2 细胞计数
取置于肝素管内的细胞。用生理盐水稀释10倍及100倍；取稀释液0.9mL，加台盼蓝(0.2%台盼蓝生理盐水液)0.1mL，混匀。用白细胞计数法计瘤细胞总数。同时计算受感染的死细胞数。因瘤细胞死后，细胞膜的通透性改变，细胞可被台盼蓝染成蓝色。
3 接种
腹水用无菌含葡萄糖的平衡盐水(如Hanks氏液、Gey氏液、洛氏液、Earle氏液等)稀释至适当的浓度，作腹腔注射，每鼠注入0.1－0.2mL。整个操作应在60min内完成。
一般在试验结束后次日称体重，逐日记录。对照组动物通常在2－3周内全部死光，个别存活时间太长者需剔除，但各组亦应相应地剔除一只。如试验期间对照组动物于7d内死亡≥20%，表示试验失败。如对照组内20%动物存活4周以上，实验亦应作废，受试物组观察时间一般为60d(生存超过此时限者，仍按60d计算)。分别记录对照组和受试物组的平均生存时间。
白血病株的接种腹水型白血病如L1210及P388的接种同腹水型肿瘤接种法。L615小白鼠白血病的接种则按下述方法进行。取L615白血病小白鼠(约接种后第6d)，颈椎脱臼，在无菌条件下，剪取脾脏一小块(约米粒大小)，放置玻璃组织匀浆器内，加少量无菌生理盐水，制成细胞悬液，并稀释至8－9mL，取一定量加0.2%台盼蓝缓冲液，计每毫升悬液的活细胞数(台盼蓝终浓度为0.02%)。根据活细胞数值适当稀释悬液将细胞数调整至4×107/mL，接种于小鼠皮下，每鼠接种细胞悬液0.1－0.2mL。
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