干热灭菌

 

实验二十二 干热灭菌

 

　　一、目的要求

　　1．了解干热灭菌的原理和应用范围。

　　2．学习干热灭菌的操作技术。

　　二、基本原理

　　干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烤焦，甚至引起燃烧。干热灭菌使用的电烘箱的结构如图Ⅵ-3。

 

　　三、器材

　　培养皿，试管，吸管，电烘箱等。

　　四、操作步骤

　　1．装入待灭菌物品

　　将包好的待灭菌物品（培养皿、试管、吸管等）放入电烘箱内，物品不要摆得太挤，以免妨碍热空气流通。同时，灭菌物品也不要与电烘箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火。

　　2．升温

　　关好电烘箱门，插上电源插头，拨动开关，旋动恒温调节器至红灯亮，让温度逐渐上升。如果红灯熄灭，绿灯亮，表示箱内已停止加温，此时如果还未达到所需的160—170℃温度，则需转动调节器使红灯再亮，如此反复调节，直至达到所需温度。

　　3．恒温

　　当温度升到160—170℃时，借恒温调节器的自动控制，保持此温度2小时。

　　4．降温

　　切断电源，自然降温。

　　5．开箱取物

　　待电烘箱内温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。注意电烘箱内温度未降到70℃以前，切勿自行打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。

　　五、实验报告

　　思考题

　　（1）干热灭菌完毕后，在什么情况下才能开箱取物？为什么？

　　（2）为什么干热灭菌比湿热灭菌所需要的温度高，时间长？