原理
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌所需温度高(160-170℃),时间长(1-2小时)。但干热灭菌温度不能超过180℃,否则,包器皿的纸或棉塞就会烤焦,甚至引起燃烧。干热灭菌使用的电烘箱的结构如图Ⅵ-3。
材料与仪器
培养皿 试管 吸管
蒸馏水
培养皿 试管 吸管 电烘箱
蒸馏水
培养皿 试管 吸管 电烘箱
步骤
一、装入待灭菌物品
将包好的待灭菌物品(培养皿、试管、吸管等)放入电烘箱内,物品不要摆得太挤,以免妨碍热空气流通。同时,灭菌物品也不要与电烘箱内壁的铁板接触,以防包装纸烤焦起火。
二、升温
关好电烘箱门,插上电源插头,拨动开关,旋动恒温调节器至红灯亮,让温度逐渐上升。如果红灯熄灭,绿灯亮,表示箱内已停止加温,此时如果还未达到所需的160-170℃温度,则需转动调节器使红灯再亮,如此反复调节,直至达到所需温度。
三、恒温
当温度升到160-170℃时,借恒温调节器的自动控制,保持此温度2小时。
四、降温
切断电源,自然降温。
五、开箱取物
待电烘箱内温度降到70℃以下后,打开箱门,取出灭菌物品。
注意事项
1. 电烘箱内温度未降到70℃以前,切勿自行打开箱门,以免玻璃器皿炸裂。
2. 需要等温度完全上升到一定高度时才可以计时。
常见问题
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关,在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固就越快,反之含水量越小,凝固缓慢。
来源:丁香实验