生物因素对微生物的影响

实验三十八 生物因素对微生物的影响

　　一、目的要求

　　了解某一抗生素的抗菌范围；学习抗菌谱试验的基本方法。

　　二、基本原理

　　许多微生物在其生命活动过程中能产生某种特殊的代谢产物，具有选择性地抑制或杀死其他微生物的作用，例如抗生素。不同抗生素的抗菌谱是不同的，某些抗生素只对少数细菌有抗菌作用，例如青霉素一般只对革兰氏阳性菌有抗菌作用，多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为窄谱抗生素；而另一些抗生素则对多种细菌有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有作用，这类抗生素称为广谱抗生素。

　　如果将产生某种抗生素的菌划直线接种在豆芽汁葡萄糖琼脂培养基平板上，经培养后，就会长出一条菌带，并产生某种抗生素向菌带周围扩散。再与这条菌带相垂直划直线接种某些不同的试验菌，就会产生不同长度的抑菌带，如图Ⅸ-3。根据抑菌带的长短，即可判断该抗生素对不同微生物的影响。本实验说明产黄青霉产生的青霉素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制效果。

　　三、器材

　　产黄青霉（Peenicillium chrysogenum）、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌；

　　豆芽汁葡萄糖琼脂培养基，无菌平皿，接种环等。

　　四、操作步骤

　　1．将豆芽汁葡萄糖琼脂培养基溶化后，冷至45℃左右倒平板，凝固待用。

　　2．用接种环挑取产黄青霉的孢子在平板上按图Ⅸ-3，1所示划一直线。

　　3．接种后，倒置于28℃温室中培养2—3天。

　　4．待上述平板形成菌苔后，再用接种环从产黄青霉菌的菌带边缘但不要接触菌苔分别垂直向外划直线（图Ⅸ-3，2）接种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌。

　　5．倒置于37℃温室培养24小时。

　　6．观察结果。

　　五、实验报告

　　1．结果

　　绘图表示并说明产黄青霉所产生的青霉素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的抑菌效能。

　　2．思考题

　　(1)在测定抗生素的抗菌范围时，应选用什么样的试验菌为好？为什么？

　　(2)如果抑菌带内隔不久又长出少数单个菌落，你将如何解释这种现象？