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限制酶 restriction enzyme

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1918

  限制酶 restriction enzyme 参与寄主支配性限制的酶。是可识别 DNA的特定碱基排列而切断链的核酸内切酶,因此,又称为核酸内切限制酶,目前已从各种细菌类中得到纯化的特异性不同的酶。这种酶广泛存在于生物界,并因生物种属的不同而其特异性有所不同。因此在酶的名称上加有生物种属的简称。例如,从流感嗜血杆菌 d H aemophilus influenzae d)菌株中分离出的酶称为 Hind限制酶或 R Hind R为限制的缩写)。又在同一生物种属中含有复数的酶时,则再加上 I I等数字,从大肠杆菌的 B株、 K株等分离出来的酶,在反应时,必须有 ATP S-腺苷蛋氨酸和 Mg2 。与此相对应的,从持有耐药因子的大肠杆菌中分离出的酶( R Eco RⅠ,Ⅱ)和从嗜血杆菌属( Haemoph-lius)分离出的酶( R Hap R Hind R Hpa等),只需要 Mg2 。这些酶决定着切断部位的碱基排列。虽排列因酶而有所不同,但都是具有双重旋转对称性。例如, R· HindⅡ如下图所示,是在第 6个碱基排列的部位按箭头的位置切断( A:腺苷, C:胞苷, G:鸟苷, T:胸苷, P:磷酸):另一方面,该菌含有的修饰酶在上面排列的腺苷上(带 *号的)使其甲基化,一旦甲基化后限制酶就不起作用了。通常认为限制酶和修饰酶在结构上是有关连的,例如,大肠杆菌 B株的限制酶是由三个亚基组成,而修饰酶是由其中的二个亚基组成。

 

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