蛋白芯片制作与应用-液态芯片
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液态芯片原理
编码微球:分别用不同配比的两种荧光染料将直径5.6μm的聚苯乙烯微球(Beads)染成不同的荧光色,从而获得多达100种经荧光编码的微球。
交联探针、抗体或抗原:把针对不同检测物的核酸探针、抗体或抗原以共价方式结合到特定荧光编码的微球上。
检测反应:先把针对不同检测物的、用不同荧光色编码的微球混合,再加入被检测物(可以是血清中的抗原、抗体或酶等,也可以是PCR产物)。 悬液中的微球与被检测物特异性结合,结合物被标记上荧光物质。
激光分析:微球成单列通过两束激光,一束判定微球的荧光编码;另一束测定微球上的报告分子的荧光强度。
1)液态芯片目前仍然处于基础研究方面,虽然已经有部分临床研究,但可能离大规模应用还有一段距离。
2)常见的应用如肿瘤、内分泌、自身免疫等的检测,也有人将其用于细胞因子谱判断。
3)下面是一些液态芯片相关经典的文献,有时间参考一下
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2. Carson RT, Vignali DA. Simultaneous quantitation of 15 cytokines using a multiplexed flow cytometric assay. J Immunol Methods, 1999,30.227(1 -2) :41 -52..
3. Karlar,G. A, M. Jeddi-Tehrani, F. Shokri. Diminished Thl and Th2 cytokine production in healthy adult nonresponders to recombinant hepatitis B vaccine. Scand. J Immunol,2002 ,55 :311-314..
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5. Wilco de Jager, Henk te Velthuis, Berent J. Prakken, et al. Simultaneous Detection of 15 Human Cytokines in a Single Sample of Stimulated Peripheral Blood Mononuclear Ceils. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology,2003,10( 1 ) :133-139..
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9. David Opalka, Charles E. Lachman, Stefani A. MacMullen, et al. Simuhaneous Quantitation of Antibodies to Neutralizing Epitopes on Virus-Like Particles for Human Papillomavirus Types 6,11,16, and 18 by a Multiplexed Luminex Assay. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology,2003,10( 1 ) :108-115..
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