传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响

传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响

 

     实验目的

 

 

1 、掌握离体平滑肌的实验方法。

 

 

2 、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用

 

 

   教学时数   2 学时

 

 

    实验原理

 

 

一、 离体实验

 

 

1、 所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验

 

 

2、 特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量药物的筛选。

 

 

3、 要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。

 

 

         （ 1 ）温度： 38±0.5 ℃

 

 

         （ 2 ）通氧气： 1 － 2 气泡 /s

 

 

          （ 3 ）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。

 

 

二、离体肠管实验

 

 

1 、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择

 

 

（ 1 ）小肠：十二指肠、空肠、回肠

 

 

（ 2 ）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。

 

 

（ 3 ）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验

 

 

2 、肠内受体及作用原理

 

 

（ 1 ）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、 M 受体。

 

 

（ 2 ）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张； M 受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。

 

 

（ 3 ）药品对受体的作用：

 

 

1 、氯化乙酰胆碱（ Ach ）： M 受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋 M 受体，使小肠收缩幅度增加，蠕动加强。

 

 

2 、阿托品 (Atro) ： M 受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断 M 受体，对抗乙酰胆碱的 M 样作用，使肠管收缩幅度降低。

 

 

3 、肾上腺素 (Ad) ：α、β受体激动剂， 可激活 α、β受体（主要是β ₂ 受体），α、β受体激动可产生与 M 受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。

 

 

4 、氯化钙（ Bacl₂ ）： ① Ba²⁺ 进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩， ② Ba²⁺ 可使细胞膜发生去极化。所以加入 Bacl₂ 肠管会发生强直性收缩， Bacl₂ 并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。

 

 

    实验材料

 

 

1 ．动物：家兔

 

 

2 ．药品① 5X10^-4 氯化乙酰胆碱

 

 

       ② 0.5 ％硫酸阿托品

 

 

       ③ 0.1% 盐酸肾上腺素

 

 

       ④ 20 ％ BaCL₂

 

 

3 、器材： RM6240 多媒体化生物信号记录分析系统、 PC80586 计算机、张

 

 

力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“ L ”型通气钩、高位吊瓶、量

 

 

筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、

 

 

注射器、台式营养器。

 

 

    实验方法

 

 

    一、首先调试 RM6240 系统，使进入肌张力测定状态．

 

 

    1 ．在主菜单中用鼠标选择 < 实验 > 中的 < 消化 > ，选择系统显示 < 平滑肌生理特性 > 。

 

 

2 ．在界面右侧控制参数区选择 < 张力 >, 〈选择 3g 〉 , 扫描速度 1.0s/div, 确定信号输入，选择〈通道 2 〉，在工具菜单选择快速归零（空载时钩上无任何东西）。

 

 

     3 ．在主菜单中选择〈示波〉，进入示波状态。

 

 

     4 ．在主菜单中工具栏选择〈网格切换〉对背景网格进行切换为细格，并在选项中选择波形颜色红色。

 

 

        此时肌张力测试调试完毕。

 

 

    二、调节仪器：

 

 

    将超级恒温水浴温度调至 38.5 ± 0.5 ℃，向麦氏浴槽中加 30ml 台氏液，通

 

 

入氧气 (1 ～ 2 个气泡／秒 ) 并制备家兔肠管标本。

 

 

     三、正式试验：

 

 

  将肠管标本两端用缝针各穿一线，一端打一空结 ( 约 lcm 小套 ) ，另一端穿

 

 

上长线打结，用眼科镊钳住空结固定于通气钩上，放入麦氏浴槽中，将另端长

 

 

线的尽端打一空结，挂在张力换能器的小钩上，调节换能器高度，使前负荷为 1

 

 

g ，稳定标本 20 分钟。

 

 

  在主菜单下按键选择〈记录状态〉，先描记一段正常曲线，然后按下列顺序给药。

 

 

    ①向麦氏浴槽内加入 5X10^-4 MAch0.2ml 同时用标记框在屏幕上作给药标记，观察肠段反应。当反应最明显时，用暂停键，将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管 3 遍，稳定标本 15 分钟，加入下列药物。

 

 

    ②将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加

 

 

0 ． 5 ％阿托品 0 ． 2ml 并作标记，观察曲线变化， 1 分钟后加 5X10^-4 MAch0 ． 2ml

 

 

并标记，观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后，用台氏液冲洗肠管 3

 

 

遍。稳定标本 15 分钟

 

 

    ③将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加 0 ． 01

 

 

％ Adr0.1ml 并作标记，观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管，稳定标本，加下列药物。

 

 

    ④将系统重新转入“记录状态”，描记一段正常曲线后，向麦氏浴槽中加

 

 

20 ％ BaCl₂ 0 ． 2ml 并作标记，观察曲线变化。

 

 

    在主菜单下选择“结束实验”，激活工具栏，系统进入分析状态。

 

 

   实验结果处理

 

 

    在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉，测量后按工具栏中取消标志线，测出正常曲线，加 Ach 后，加阿托品回复后，加 Adr 后加 BaCl2 后肠管的收缩张力，分别求出加 Ach 、 Adr 、 BaCl2 所引起的张力变化值及 Atro 对 Ach 拮抗的张力回缩值，以全班数据进行统计，作 t 检验，并判断各药的作用是否显著。

 

 

  在主菜单下打印项进行打印模式设置，可倒入测量信息、学生实验、实验信息后，预览、打印。

 

 

   注意事项

 

 

1、 操作时应避免牵拉肠管，造成肠管活性不好。

 

 

2、 肠管两端穿线采用十字交叉法，肠管不易扭曲，便于营养液的流通。

 

 

3、 每次给药前均应冲洗肠管 3 次，中间间隔 1 分钟。

 

 

4、 BaCl₂ 可使肠管产生强直性收缩，不能恢复，所以最后加 BaCl₂ 。

 

 

5、 给药时将药液直接加入药液，不要碰线，也不要碰壁。