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传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响

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21424

传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响

实验目的

1 、掌握离体平滑肌的实验方法。

2 、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用

教学时数 2 学时

实验原理

一、 离体实验

1、 所用组织:心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验

2、 特点:实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间,可进行大量药物的筛选。

3、 要求:离体实验需在一定生理环境下进行,模拟体内环境。

( 1 )温度: 38±0.5 ℃

( 2 )通氧气: 1 - 2 气泡 /s

( 3 )营养液:含有一定离子和葡萄糖的溶液,不同的组织所选用的营养液不同。

二、离体肠管实验

1 、肠管的选择:根据实验目的的不同进行选择

( 1 )小肠:十二指肠、空肠、回肠

( 2 )自律性:频率较慢,起博点位于十二指肠,自律性自上而下渐弱。

( 3 )空肠多做定性实验,回肠多做定量实验

2 、肠内受体及作用原理

( 1 )受体:家兔小肠平滑肌上存在α、β、 M 受体。

( 2 )作用:α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张; M 受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。

( 3 )药品对受体的作用:

1 、氯化乙酰胆碱( Ach ): M 受体激动剂,乙酰胆碱可兴奋 M 受体,使小肠收缩幅度增加,蠕动加强。

2 、阿托品 (Atro) : M 受体阻断药,为竞争性拮抗剂,单独用药对肠管无作用,可阻断 M 受体,对抗乙酰胆碱的 M 样作用,使肠管收缩幅度降低。

3 、肾上腺素 (Ad) :α、β受体激动剂, 可激活 α、β受体(主要是β 2 受体),α、β受体激动可产生与 M 受体激动相反的效应,表现为肠管舒张,小肠蠕动减弱。

4 、氯化钙( Bacl2 ):

① Ba2+ 进入细胞与钙调蛋白结合,使平滑肌收缩;

② Ba2+ 可使细胞膜发生去极化。所以加入 Bacl2 肠管会发生强直性收缩, Bacl2 并非作用于受体,所以阿托品不能对抗这一作用。

实验材料

1 .动物:家兔

2 .药品① 5X10-4 氯化乙酰胆碱

② 0.5 %硫酸阿托品

③ 0.1% 盐酸肾上腺素

④ 20 % BaCL2

3 、器材: RM6240 多媒体化生物信号记录分析系统、 PC80586 计算机、张

力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“ L ”型通气钩、高位吊瓶、量

筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、

注射器、台式营养器。

实验方法

一、首先调试 RM6240 系统,使进入肌张力测定状态.

1 .在主菜单中用鼠标选择 < 实验 > 中的 < 消化 > ,选择系统显示 < 平滑肌生理特性 > 。

2 .在界面右侧控制参数区选择 < 张力 >, 〈选择 3g 〉 , 扫描速度 1.0s/div, 确定信号输入,选择〈通道 2 〉,在工具菜单选择快速归零(空载时钩上无任何东西)。

3 .在主菜单中选择〈示波〉,进入示波状态。

4 .在主菜单中工具栏选择〈网格切换〉对背景网格进行切换为细格,并在选项中选择波形颜色红色。

此时肌张力测试调试完毕。

二、调节仪器:

将超级恒温水浴温度调至 38.5 ± 0.5 ℃,向麦氏浴槽中加 30ml 台氏液,通

入氧气 (1 ~ 2 个气泡/秒 ) 并制备家兔肠管标本。

三、正式试验:

将肠管标本两端用缝针各穿一线,一端打一空结 ( 约 lcm 小套 ) ,另一端穿

上长线打结,用眼科镊钳住空结固定于通气钩上,放入麦氏浴槽中,将另端长

线的尽端打一空结,挂在张力换能器的小钩上,调节换能器高度,使前负荷为 1

g ,稳定标本 20 分钟。

在主菜单下按键选择〈记录状态〉,先描记一段正常曲线,然后按下列顺序给药。

①向麦氏浴槽内加入 5X10-4 MAch0.2ml 同时用标记框在屏幕上作给药标记,观察肠段反应。当反应最明显时,用暂停键,将计算机转入“示波状态”。用台氏液冲洗肠管 3 遍,稳定标本 15 分钟,加入下列药物。

②将系统重新转入“记录状态”,描记一段正常曲线后,向麦氏浴槽中加

0 . 5 %阿托品 0 . 2ml 并作标记,观察曲线变化, 1 分钟后加 5X10-4 MAch0 . 2ml

并标记,观察肠段反应。将计算机转入“示波状态“后,用台氏液冲洗肠管 3

遍。稳定标本 15 分钟

③将系统重新转入“记录状态”,描记一段正常曲线后向麦氏浴槽中加 0 . 01

% Adr0.1ml 并作标记,观察曲线变化。将计算机转入“示波状态”下冲洗肠管,稳定标本,加下列药物。

④将系统重新转入“记录状态”,描记一段正常曲线后,向麦氏浴槽中加

20 % BaCl2 0 . 2ml 并作标记,观察曲线变化。

在主菜单下选择“结束实验”,激活工具栏,系统进入分析状态。

实验结果处理

在主菜单下分析项可选择区域测量、标记查询、开始反演、鼠标捕捉,测量后按工具栏中取消标志线,测出正常曲线,加 Ach 后,加阿托品回复后,加 Adr 后加 BaCl2 后肠管的收缩张力,分别求出加 Ach 、 Adr 、 BaCl2 所引起的张力变化值及 Atro 对 Ach 拮抗的张力回缩值,以全班数据进行统计,作 t 检验,并判断各药的作用是否显著。

在主菜单下打印项进行打印模式设置,可倒入测量信息、学生实验、实验信息后,预览、打印。

注意事项

1、 操作时应避免牵拉肠管,造成肠管活性不好。

2、 肠管两端穿线采用十字交叉法,肠管不易扭曲,便于营养液的流通。

3、 每次给药前均应冲洗肠管 3 次,中间间隔 1 分钟。

4、 BaCl2 可使肠管产生强直性收缩,不能恢复,所以最后加 BaCl2 。

5、 给药时将药液直接加入药液,不要碰线,也不要碰壁。

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