哺乳类实验动物病理剖检方法
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一、基本要求
（一）实验动物背景资料记录
（1） 实验动物来源、种类、年龄、性别、原编号、体重、临床症状等。
（2） 剖检时间、地点，麻醉方法、时间、麻醉者，处死方法、解剖者、记录人、温度、湿度。
（3） 其他指标：动物剖杀前禁食（不禁水）时间一致，为12h。
（二）体表检查
一般用于组织学取材的实验动物剖杀前应先隔离检疫7～10d，用于实验组和对照组动物的病理剖检视不同动物实验的要求而定。剖检前的体表检查项目如下：
1、发育状态
体格发育是否与年龄、品种相称，各部发育比例是否正常，有无畸形。
2、营养状态
丰满还是消瘦，检查时可用手抚摸实验动物背、腰部，营养良好时，背腰部厚实，皮肤弹性好。营养不良时，背腰部椎骨突出，肋骨明显。
3、精神状态
实验动物的自主活动、运动情况，对外界的反应（迟钝或亢进）、步态如何。
4、感觉器官
眼睛的瞳孔是否清晰等，有无分泌物，眼睑有无发炎及红肿，球结膜颜色变化，有否潮红、苍白、黄染或发绀。
5、呼吸系统
呼吸动物如呼吸次数、节律、有无呼吸困难；上呼吸道检查如鼻腔分泌物多少、有无喷嚏和咳嗽；必要时可通过听诊检查肺部。
6、消化系统
采食与饮水观察，包括食欲废绝、减退、亢进和异嗜，口腔黏膜颜色和气味。有无呕吐、腹泻、便秘，肛周有无污物，粪便数量、硬度、颜色、气味等。
7、被毛和皮肤
检查皮肤颜色、温度、弹性、有无创伤、脓疡、疥癣、湿疹，毛发色泽、疏密、有无脱落。
（三）病理取材基本要求
（1） 病理检查应分层次进行，先进行一般外观观察，然后剖检观察，再进行光镜详细检查。
（2） 通常选择正常与病变交界处组织，即包括病变本身及病变周围组织。
（3） 对照组动物相同器官取材时，选材部位应尽量一致。
（4） 肉眼看不到的明显病变时，各试验组选取标本位置应一致。
（5） 所选组织应包括脏器全部层次结构或重要结构，如肾应包括皮质、髓质和肾盂。
（6） 体积大和分叶的器官，应视不同组织选取多个部位，小器官可整体取材并固定，如淋巴结、扁桃体、甲状腺等。
（7） 胃肠标本应将内容物冲洗掉，以免内容物影响组织固定，产生自溶。
（8） 所取材料应尽量保持肉眼标本的完整性，不宜过厚或过薄，一般厚约3～5mm，大小为1.5～2cm2 。
（9） 切取组织时不要挤压，使用锋利刀具，少用剪刀，勿选用被器械钳压过的部位。
（10） 标本取材要熟悉，尽可能快的完成整个过程，特别是易自溶的组织，如肠道、脑、腺体等。
（11） 剖检记录应客观、详细，用形象描述而不能用诊断的病名来代替。
（12） 同一实验中的对照组和实验组动物应交叉剖检，严格统一各种条件和操作，尽量避免各种可能的干扰因素。
二、病理剖检基本操作
（一）常用器械及使用方法
1、解剖刀
主要用于切开和分割软组织，刀片宜用血管钳（可持针钳）夹持安装，避免割伤手指。
常用的持刀法有以下4种：执弓式、抓持式、执笔式、反挑式。
2、手术剪
用于分离与剪开
3、血管钳
用于分离和钳夹组织，钳夹缝合针和布巾等。
4、手术镊
用于夹持组织，以利于解剖和缝合。
5、拉钩
用于牵引和暴露
（二）基本操作
1、切开
在同一平面上时，先绷紧组织，将刀刃与平面垂直，用力要得当，一次垂直切开，切口整齐而不偏斜，禁止斜切和锯切，以减少损伤。切开多层组织时，一般应按组织层次分层切开，避免损伤深层组织器官。
2、组织分离法
可用锐性分离法，使用刀、剪等锐性器械直接切割，如皮肤、黏膜、精细结构和紧密连结组织的分离；也可用钝性分离法，使用分柄、止血钳、剥离器，手指等分离，如肌肉，疏松结缔组织等的分离。
3、结扎
用丝线打结的方法扎组织和血管，参与缝合器官和皮肤。
4、止血
大量出血导致胸、腹部积血使剖检视野模糊不清，可能会影响和干扰病变的辨别和取材，因此动物剖检有时要求止血。
（1） 纱布块压迫止血法。剖检过程中，为观察病变性质和部位，辨清组织和神经、血管通路，以及对较广泛的毛细血管渗出，可用纱布按压施行短暂性的止血，但不可用纱布来回擦拭血液，以免损伤组织。
（2） 钳夹止血法。先用纱布块止血，看清出血点或血管后用止血钳的尖端垂直对准出血点，迅速而准确的钳夹并捻转，使血管闭塞而止血。
（3） 结扎止血法。用于动脉出血或较大的血管出血。
三、剖检取材程序
（一）实验动物尸体的固定，通常为仰卧位固定。
（二）剖检顺序多为先腹腔后胸腔，再脑、脊髓、骨髓、皮肤肌肉等。取材顺序基本与此相同。
（三） 检查内容
1、位置
有无移位、异位
2、大小
体积增大、缩小或肿大
3、色泽
整体或局部颜色的增减改变。
4、附加物
有无出血、积液、粘连。
5、质地
硬、韧、软等。
6、切面
多汁、泡沫状、带血、脓汁、干燥等。
7 、中空器官的黏膜面
有无出血、溃疡、增厚、隆起物等。
（四）剖检和取材程度
1、腹腔和腹腔器官
沿腹部正中线切开剑突至肛门之间的腹前壁，再沿最低位肋骨分别向左右两侧切开侧腹壁至脊柱两旁，完全暴露腹腔器官。观察有无积液、血液和炎性渗出物，如有则用吸管吸出，测量容积并经离心沉淀涂片检查，必要时作细菌培养。检查粘膜是否光滑，有无充血、瘀血、出血、破裂、脓肿、粘连、肿瘤、寄生虫等，膈的紧张度及有无破裂。
（1）脾脏。检查大小、厚薄、硬度、性状、色泽、有否肥厚、破裂等。然后沿长轴将脾切成两半，切面要平整，检查脾小梁、红髓、滤泡的色泽，切面的出血量。
（2） 胰腺。检查胰腺色泽和硬度，切面检查有无出血。
（3）胃肠。检查胃的大小、胃肠道浆膜面的色泽，有无粘连、肿瘤、寄生虫结节。然后沿胃大弯、肠系膜附着部依次剪开胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠。观察胃内有无异物，内容物的气味及性状，除去内容物，检查黏膜颜色，有无充血、出血、化脓。采用边剪开边观察的办法检查肠管，观察肠内容物数量、性状，有无气体、血液、异物、寄生虫，肠黏膜皱壁有无增厚、水肿、充血、粘液量、溃疡、坏死、淋巴组织性状及有无炎症。
（4） 肾脏。首先检查肾脏大小、硬度、被膜是否容易剥离，肾表面的色泽、平滑度，有无疤痕、出血变化。然后检查切面皮质和髓质的色泽，有无瘀血、出血、化脓和梗死。注意观察皮质和髓质交界处的切面是否隆突，以及肾盂、输尿管、肾淋巴结的性状，有无肿瘤及寄生虫等。
（5） 肝脏。首先检查肝脏的大小、被膜的性状、边缘的厚薄、实质的硬度和色泽，以及肝淋巴结、血管、肝管等的性状。然后作切面，检查切面的出血量、色泽，肝小叶性状、有无脓肿、肝坏死等变化。
（6） 肾上腺。观察外形、大小、色泽和硬度，作纵切和横切，检查皮质和髓质的色泽及有无出血。
2、盆腔器官
（1） 膀胱。检查膀胱的大小、尿量及色泽，黏膜有无出血、炎症和结石等。
（2） 雄性生殖器官。检查睾丸、附睾、凝固腺、前列腺有无粘连、出血、水肿、积液等。
（3） 雌性生殖器官。沿子宫体背侧剪开子宫角，检查子宫内膜的色泽、有无充血、出血、炎症等，观察卵巢和输卵管有无粘连、出血、水肿、积液等。
3、胸腔、口腔及其器官
用镊子夹住胸骨剑突，剪断膈肌与胸骨的连结，提起胸骨，在胸椎两侧分别剪断左、右侧胸壁的肋骨，取下整个胸壁，打开胸腔，依次取出胸腺和心脏。将下颌骨的两下颌支内侧与舌连结的肌肉切断，将咽、喉、气管、食道与周围组织分离，用镊子夹住气管向上提起，剪断肺与胸膜的连结韧带，然后将咽、喉、气管、食道连同整个肺脏一并取出。如有积液应观察其数量和性状，尽量吸取，测量容积并涂片，检查胸膜色泽，有无出血、充血或粘连。
（1） 心脏。剪开心包膜，暴露心脏，注意心包的光泽度及心包内液体的情况，心脏的大小、外形、心外膜情况。自下腔静脉入口处至右心房作直线剖开，从此直线中点沿心脏右缘剖至心尖部，从距离心尖部与心室间隔右侧1cm处平行地剖至肺动脉；检查右心房、右心室、三尖瓣、肺动脉瓣、腱索有否病变。自左右静脉入口处将左心房直线切开，沿心脏左缘剖至心尖部，再从距离心尖部与心室间隔左侧1cm处平行地剖开左心室的前壁和主动脉，检查二尖瓣、主动脉瓣、腱索有无病变，左心房、左心室内壁有无出血和感染。自冠状动脉口起剪开前降支和旋支，在主动脉根部右侧，于右心室的心外膜找到右冠状动脉主干，先横切一刀，再剪至后降支；观察有无粥样硬化和血栓等。
（2） 口腔。检查牙齿的变化，口腔黏膜的色泽、有无外伤、溃疡和白斑，舌黏膜有无出血、外伤及舌苔的情况。
（3） 咽喉。观察喉头、会厌软骨黏膜的色泽、淋巴结的性状及喉囊有无积脓。
（4） 鼻腔。检查鼻腔和鼻中隔黏膜的色泽、有无出血、炎性水肿、结节、糜烂、溃疡穿孔及疤痕等。
（5） 下颌及颈部淋巴结。检查下颌及颈部淋巴结的大小、硬度、有无出血和化脓等。
（6） 气管。检查气管有无出血、黏液量等。
（7） 肺脏。检查肺的色泽、有无出血、炎症、肺气肿、肺萎缩、肿瘤等。
（8） 其他器官。胸腺，甲状腺，扁桃体等的色泽、有无粘连、出血、水肿等。
4、颅腔及脑
以猴为例，剥离颅顶部软组织，沿眉弓至枕外隆凸上0.5cm处的连线，用弓形锯环绕该线锯开颅骨外板及板障，然后用丁字凿轻轻凿开内板，揭开颅盖，此时可见覆盖于脑表面的硬脑膜，切开硬脑膜暴露脑组织，在距颅骨锯口断端上0.5cm处，从前向后环行剪开硬脑膜，枕部的硬脑膜应保留1.5cm长，防止取脑过程向后推压脑组织时，枕骨断端损坏枕叶脑组织。向后方轻轻揭起硬脑膜及大脑镰，暴露脑组织，用手指从额骨前上方伸入颅前窝，轻轻推压大脑额叶，直至见到筛板上的嗅球为止，切断嗅丝与嗅球的联系，将嗅球与脑一齐拉起，见到视神经和视交叉时立刻停止，在脑底附近依次切断颈内动脉、视神经，再将脑向后拉，可见到垂体及漏斗，继续将脑向后拉起，切断连于脑的脑神经。从脑干腹侧面把手术刀伸入枕骨大孔，切断脊髓，即可将脑取出，用流水冲洗干净备用。新鲜脑很软，易变形和受挫伤，操作过程中必须用手扶托，取出脑后应立刻用纱布包裹，浸泡固定液中保存，以免变形。
检查软脑膜、硬脑膜血管充盈情况，脑回之间的脑沟中液体的数量与色泽，脑表面凸起或凹下的地方是否明显，可用手触膜判定其硬度。用刀将脑做一水平切面，保留胼胝体，暴露侧脑室，注意检查尾状核有无出血、软化灶。侧脑室内容物数量、性质，然后将脑做多处切面，检查有无变化。
四、脏器测量和称重
（1） 解剖后应迅速将脏器称重，以免水分蒸发造成差异，特别是肾上腺等小器官的称重。
（2） 脏器称重前应尽量将周围脂肪组织和结缔组织剔除，并用滤纸吸去脏器表面血液及体液，特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等较小的器官，更要新鲜称重，防止器官干燥失水而重量减轻。
（3） 空腔器官称重前，应清除其腔内液体，如心脏应除去血块。
