实验室仪器之PCR仪的使用

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PCR仪，也称DNA热循环仪、基因扩增仪，它是使一对寡核苷酸引物 结合到正负DNA链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA片段，它的每一循环包括在三种不同温度进行DNA变性、引物复性、DNA聚合酶催化的延伸反应的三个过程。

PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域，如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等。随着分子生物学的不断发展，PCR扩增技术也得到普及推广应用，因此了解PCR仪的性能，熟练掌握仪器 的正确使用方法及使用过程中的注意事项，将是十分必要的。

现介绍PCR 扩增仪(Tl Thermocycler)的使用方法和注意事项。

1. 使用方法

(1)接通电源开关，仪器进入准备状态;在显示屏上记录了当前仪器的温度和盖子(Lid)的温度。若仪器正在运行时，须按“ B ”键(start/stop)，才能退出运行并返回准备状态。

(2)编写程序段。在准备状态下按“ C ”键(programs)进入编程状态，选定一程序号，然后按“enter”键，进入下一程序;按 “A”(list)键后，选一文件号(empty program);再按“enter”键，进入下一程序;按“ABC”键，进入下一程序，用上下左右键号选择一个字母(A、B、C、D、…)，然后按“enter”键，进入下一程序;按“name ok”键，完成文件命名。

(3)设定盖子的温度。“lid temp： ℃”，盖子的温度一般比变性温度要高10℃，例如变性温度是95℃，那么盖子的温度就要设定为105℃。待盖子预热后按“enter”键，进入下一程序。

(4)设定变性温度、变性时间、延伸温度、延伸时间、退火温度、退火时间及循环总数等参数。从第一步依次按“enter”键进入，用四个移位键移动设定位置。先设定温度，后设定时间，全部参数设置完后，按“pgm ok”键，所设定的程序自动被保存。

(5)运行程序。检查设定是否正确， 按“start”键，选择设定好的程序，开始运行。显示屏上可观察到系统运行的情况，按“Stop”可停止运行。