几个关于LB培养基的有趣事实
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lb培养基 是每个实验室最常用的物品,用于大肠杆菌的培养,在分子克隆实验室更是必备品。LB培养基或平板可能是你进入实验室最早接触的东东,但下面有几个关于LB培养基的有趣事情,您知不知道?
1、1950年Giuseppe Bertani在研究细菌溶源性过程中,为优化志贺氏菌属的噬斑性状首次制备了LB培养基 。很多研究人员误认为LB培养基是Luria-Bertani的简称。但LB培养基的发明者已在其文章“20世纪中期溶源性研究进展:P1、P2以及其他实验系统”中说明,命名原意是溶源性培养基的简称,而不是他和他同事Salvadr Luria的名字简称。
2、自己配制 培养基比购买市售产品便宜的多,且一些市售产品可能会含有抑制某些株的大肠杆菌生长的污染物,但如果自己培养LB培养基,需对其配制过程进行严格控制,避免批间差异[3]。
3、目前有多种LB培养基的配方,一般主要为:10g胰蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠,溶于1L无菌水内,用1N 氢氧化钠调节pH至7.0,于120℃高压蒸汽灭菌不超过25分钟[2]。
4、LB培养基能够供大肠杆菌生长在600nm的吸光值(OD600)为7,但是,当生长速度变慢以及细胞大量减少,静默生长期的OD600仅为0.3。生长停止的原因为培养基内缺少可用的碳源[2]。
5、您需要在高压蒸汽灭菌前配制培养基以防止杂菌的污染(例如,不超过两三个小时)。但是,需要注意在灭菌前不要添加抗生素,以避免高温使抗生素失效。一旦添加抗生素至LB培养基,于4℃保存。