体液分别改变在家兔急性失血中的代偿作用

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模拟实验20 体液分别改变在家兔急性失血中的代偿作用

【目的】

本实验采用动脉血压的直接测量方法，观察神经和体液因素对动脉血压的调节作用，了解家兔急性失血模型的建立方法，观察家兔急性失血期间及停止失血后其动脉血压的变化及血红蛋白 浓度的变化。

【原理】

在生理情况下，人和其它哺乳动物的血压相对稳定，这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射起着重要作用。此反射既可在血压升高时降压，又可在血压降低时升压，反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经，又称减压神经，易于分离和观察其作用。在人、犬等动物，主动脉神经与迷走神经混为一条，不能分离。反射的传出神经为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管纤维，心交感神经兴奋，其末梢释放去甲肾上腺素，去甲肾上腺素与心肌细胞 膜上的b受体结合，引起心脏正性的变时变力变传导作用，心迷走神经兴奋，其末梢释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，引起心脏负性的变时变力变传导作用，交感缩血管纤维兴奋，其末梢释放去甲肾上腺素，去甲肾上腺素与血管平滑肌细胞膜上的a受体结合，引起阻力血管的收缩。

机体对一定量 的急性失血有代偿能力。急性失血使动脉血压下降，血容量减少，在失血的瞬时，通过压力感受性反射和容量感受性反射，阻力血管、容量血管收缩、心脏活动增强以维持动脉血压。急性失血引起交感-肾上腺髓质系统兴奋，导致儿茶酚胺大量分泌，出现血管的明显收缩。静脉系统属于容量血管，可容纳血液总量的60%~70%。静脉的收缩可以迅速而短暂地增加回心血量。微动脉和毛细血管前括约肌比微静脉对儿茶酚胺更为敏感，导致毛细血管前阻力比后阻力升高更明显，毛细血管灌流不足，流体静压下降，使组织液进入血管，循环血量增加。抗利尿激素、血管紧张素Ⅱ、皮质激素的产生和分泌增加也参与急性失血的代偿。

本实验应用液压传递系统直接测定动脉血压。即由动脉插管、测压管道及压力换能器相互连通，其内充满抗凝液体，构成液压传递系统。将动脉套管插入动脉内，动脉内的压力及其变化，可通过密闭的液压传递系统传递压力，通过压力换能器将压力变化转换为电信号，用微机生物信号采集处理系统记录动脉血压变化曲线。

【预习要求】

1．仪器设备知识 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。

2．实验理论 实验动物知识参见第二章第一节 生理科学实验常用实验动物的种类；第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术；统计学知识参见第5章第四节 常用统计指标和方法；生理学教材有关动脉血压的调节理论，病理生理学教材有关失血性休克理论。检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。

3．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。

【材料】

家兔，200g/L氨基甲酸乙酯或10g/L戊巴比妥钠，1000U/ml肝素，0.1g/L去甲肾上腺素，10-2g/L乙酰胆碱，放血瓶，血红蛋白比色计全套，动脉插管，血压换能器，微机生物信号采集处理系统。

【方法】

1．实验系统连接及参数设置

（1）颈动脉血压测量记录装置。将血压换能器固定于铁支柱上，其位置与心脏在同一平面。

（2）安装好放血装置使股动脉插管与放血瓶相连(瓶内预先盛60ml生理盐水)，打开三通将放血系统管道内的空气排出并充满生理盐水，然后关上三通。放血瓶内放入肝素0.5ml，记下瓶内液体量，调节放血瓶高度，使瓶内液平面距离颈心脏水平约65cm处可使血压维持在6.67kPa(50mmHg)左右。

（3）压力换能器输出线接微机生物信号处理系统第1或第4通道。

（4）微机生物信号处理系统参数设置：

① RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“生理科学实验”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：1通道时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz，扫描速度：500ms/div。连续单刺激激方式，刺激强度5~10V，刺激波宽2ms，刺激频率30 Hz。

② PcLab和MedLab系统：点击“文件”菜单“打开配置”中的“动脉血压记录”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：1通道放大倍数200、直流（DC）耦合，采样间隔1ms；串刺激方式，波宽2ms，刺激强度5~10V，时程1s，频率30 Hz。

.（3）血压换能器定标 实验室已将仪器和血压换能器系统进行了定标，无须再定标。定标方法见第七章实验16。实验过程中不能改变定标数值。

2．手术准备（参见第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术）

（1）家兔称重后，氨基甲酸乙酯按1g/kg体重的剂量于耳缘静脉注射麻醉。注意麻醉剂不能过量，注射速度不宜过快。

（2）动物仰卧固定缚于手术台上，固定四肢，前肢交叉固定，用棉绳钩住兔门齿，将绳拉紧并缚于兔台铁柱上。

（3）暴露颈部气管、颈总动脉、颈静脉、迷走神经和主动脉神经。用玻璃分针仔细分离右侧上述神经，各穿以不同颜色的细丝线以供识别。分离两侧颈总动脉和两侧颈静脉，各穿二线备用。

（4）给动物静脉注射肝素，剂量为1000U/kg体重。等1分钟后再进行下一步骤，以使肝素在体内血液中混合均匀。

（5）左颈总动脉插管 颈总动脉远心端结扎，近心端用动脉夹夹住，用眼科剪在靠近结扎处动脉壁剪一Ｖ字形切口，将动脉插管向心方向插入颈总动脉内，扎紧固定。

（6）用左手拇指和另外四指将股部皮肤绷紧固定，沿股腹面正中线从腹股沟下缘向膝部切开皮肤4~5cm。用止血钳分离皮下组织，暴露股部肌肉。用玻璃分针分离股动脉，分离出血管约2~3cm，在其下面穿入2根线，结扎远心端的血管，近心端用动脉夹夹闭血管。靠近远心端血管结扎线0.3cm处，用眼科直剪呈45°角剪开血管直径的1/3，用弯型眼科镊夹住切口游离尖端并挑起，插入血管导管2~4cm，在近心端结扎血管导管。利用远心端的结扎线再次结扎插管导管。

【模拟实验操作方法】

1．模拟实验窗口（见图6-2-13） 家兔颈部动脉插管用三通压力换能器和水银检压计相连，水银检压计指示动脉血压，仿真记录仪记录血压曲线。家兔股部股动脉插管通过三通阀与放血瓶相连。

2．鼠标点击手术刀并拖动至家兔颈部释放，记录仪描记动脉血压曲线。第一道记录动脉血压曲线，第二道记录心率，第三道记录实验项目标记。仿真记录仪面板设灵敏度、位移、纸速调节按钮，面板设数字显示框，分别显示记录仪第一道灵敏度、动脉血压、心率。

3．采血及血红蛋白测定 窗口出现颈静脉和采血注射器，点击注射器针芯采血，采血完毕后，窗口出现血红蛋白吸血管，点击吸血管胶头，取血完毕，出现血红蛋白比色计和蒸馏水试剂和吸管。待血样加入血红蛋白比色计后，点击蒸馏水试剂中吸管的胶头，并拖动至血红蛋白比色计的加样口释放，随着蒸馏水加入，测试样品呈现与标准管相同的颜色并显示血红蛋白的浓度。

4．鼠标器点击股动脉插管旁的三通阀，可进行放血操作。

5．测量按钮 按测量按钮，仿真记录仪显示所做实验项目的实验曲线，仿真记录仪面板按钮变为图标按钮，有放大、缩小、压缩、扩展、定位图标按钮，分别可使仿真记录仪内的实验曲线纵向放大或缩小，横向压缩或扩展，定位图标按钮可使所选记录曲线处的位置移到仿真记录仪左边框。

7．测量状态 在测量状态下，鼠标器在仿真记录仪内移动，可对实验曲线进行测量，并从仿真记录仪的面板数字显示框“压力”和“Time”中读出血压和心动周期时间。在曲线上点击，可测量相对值。拖动仿真记录仪面板上的滚动条，可使实验曲线左右滚动，显示前后实验数据曲线。

8．操作控件均有提示。鼠标点击“返回”按钮，程序返回到模拟实验窗口。

图6-2-13 失血代偿模拟实验窗口

【观察项目】

1．记录一段正常的动脉血压曲线，从颈静脉内取血0.5ml测定Hb浓度。