维生素C的定量测定及碱、热、铜离子对其的破坏作用

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【原理】
维生素C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物，属水溶性维生素。维生素C具有很强的还原性。在碱性溶液中加热并有氧化剂存在时，维生素C易被氧化而破坏。一些重金属离子（如铜离子），也可使维生素C氧化。在中性和微酸性环境中，维生素C能将染料2,6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型2,6-二氯酚靛酚。同时维生素C氧化成脱氢维生素C。
氧化型的2,6-二氯酚靛酚在中性或碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。被还原后即失去红色。在滴定过程中，当溶液中维生素C一旦被氧化完。则再滴下的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。所以，溶液从无色转变成微红色时，即为滴定终点。从滴定时2,6-二氯酚靛酚标准溶液的消耗量，可以计算出被检物质中维生素C的含量。

【操作】
1．取萝卜或其它蔬菜5g，放入研钵中剪碎，加5%醋酸2~3mL，研磨成匀浆，再加5%醋酸至25mL，研匀，浸提5分钟，棉花过滤。
2．取滤液2mL注入50mL锥形瓶内，用0.0005M2,6-二氯酚靛酚滴定至浅红色（15秒不褪色），记录用量。按消耗2,6-二氯酚靛酚的毫升数计算出该样品中含维生素C的量。
3．取滤液2mL注入锥形瓶内，加1MNaOH2mL，混匀，停15分钟后加1MHCl12mL。再用0.0005M2,6-二氯酚靛酚滴定至浅红色，记录用量并计算出维生素C的含量。
4．取滤液2mL加入小试管中，置沸水浴中10分钟，再将其转移入锥形瓶内，用0.0005M2,6-二氯酚靛酚滴定至浅红色，记录用量并计算出维生素C的含量。
5． 取滤液2mL加锥形瓶内，加1%CuSO4 2 滴，15分钟后用0.0005M2,6-二氯酚靛酚滴定至浅红色，记录用量并计算出维生素C的含量。

【计算】
0.0005M的2,6-二氯酚靛酚1mL≈0.088mg维生素C。
消耗的2,6-二氯酚靛酚（mL）×0.5×25×0.088÷5×100=100g所测样品中所含的维生素C的毫克数。
取其它蔬菜或瓜果，按操作1、2处理。计算出维生素C的含量。

【试剂】
1．0.0005M2,6-二氯酚靛酚
2．5%醋酸
3．1MNaOH
4．1MHCl
5．1%CuSO4
需要密封的化学试剂，可以先加塞塞紧，然后再用蜡封口。有的平时还需要保存在干燥器内，干燥剂可以用生石灰、无水氯化钙和硅胶，一般不宜用硫酸。需要避光保存的试剂，可置于棕色的瓶内或用黑纸包装。