毛细管电泳分离实验的特点及应用
互联网
- 相关专题
毛细管电泳技术也称为高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)。是从传统电泳发展而来的新型高效的分析分离技术。1967年Hjerten最先提出区带电泳。1974年Virtanen提出用200~500µm内径的毛细管作电泳分离。1981年Jorgenson和Lukace首先提出在细管径毛细管内进行电泳。
1 原理
毛细管电泳的基本原理是:缓冲液中不同带电离子在高压(10~30KV)电场作用下,以石英毛细管为分离痛道,被分离物以不同的速度迁移而达到分离的目的。
2 实验流程
制备样品→选择适当的试验程序→清洗毛细管→更换电泳缓冲液进行电泳→同时在线检测
3 特点
优点:分离操作时间短,最快可达几秒;分离效率高;样品用量少,容剂消耗少,环境污染小;操作自动化程度高,可用计算机控制实现软件分析。
缺点:制备能力差;由于毛细管电泳采用内径极小,而只能进行微量分析;不能对多个样品进行平行处理,而只能对单个样品进行多次进样分析,缺乏平行对照,这要求很高的重复性。
4 应用
毛细管电泳技术主要应用于化合物的分离,如蛋白、氨基酸、核酸、对映体等的分离分离等,其在作物贮藏蛋白的实验研究中具也具有其特殊的优势。