如何配制干粉培养基
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注意事项
1. 干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根据实验需要决定。
2. 配制是要保证充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基 完全溶解之后才能添加。
3. 配制 所用的水应是三蒸水,离子浓度很低。
4. 所用器皿应严格消毒。
5. 配制好的培养 基应马上过滤,无菌保存于4度。
6. 液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基,它是一种灭菌后保证无菌的溶液,必要时可制成无内毒素等的溶液,可节省科研人员的工作量。
配制方法
1. 在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5%的双蒸水。
2. 在室温(20℃到30℃)的水中加入干粉培养基,轻轻搅拌,不要加热。
3. 水洗包装袋的内部,转移全部的痕量干粉到容器内。
4. 加NaHCO3到培养基中。
5. 用双蒸水稀释到想要的体积,搅拌溶解。注意不要过分搅拌。
6. 通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值,由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3,因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。