M199培养基的正确使用方法

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在实验室中，M199培养基可分为粉状和液体两种形式，主要应用于细胞培养 。本文介绍M199培养基的组成成分、主要性状、配制和贮存方法、以及有效期限等，以利于大家对其正确有效地使用。

一.【组成成分】

无机盐：氯化钠、氯化钙、氯化钾、无水磷酸二氢钠、六水合氯化镁等。

氨基酸：L-盐酸精氨酸、L-盐酸赖氨酸、L-谷氨酰胺、L-酪氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸等。

维生素：维生素B1、维生素B2、维生素B12、维生素C、D-生物素、盐酸吡哆醛等。

其 它：无水葡萄糖、丙酮酸钠、次黄嘌呤、亚油酸、硫辛酸、苯酚红等。

二.【产品指标】

性状 粉红色固体粉末

澄清度 澄清

①加NaHCO3 6.90～7.50

pH值

②不加NaHCO3 5.60～6.20

干燥减量的质量分数(%) ≤5.0

渗透压①加NaHCO3 295～326

(mOsm/kgH2O) ②不加NaHCO3 247～273

细菌 内毒素(EU/ml) <10

微生物 限度检细菌数&le;200

查(CFU/g) 霉菌数&le;50

细胞形态成纤维贴壁生长，形态正常无变异

细胞生长试验

细胞数量72h细胞数量>1×105个/ml。继续维持48h,细胞数量应&ge;1×105个/ml

注：详细产品技术指标见质量标准

三.【配制方法】

⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容

器。加注射用水(水温20℃～30℃)到47.5 升，轻微搅拌溶解。

⑵ 加入114.5克碳酸氢钠。

⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至50 升。

⑷ 如果必要，用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH 至所需值。

⑸ 用 0.2&mu;m 滤膜正压过滤除菌。

⑹ 溶液应在2℃-8℃下避光保存。

四.【贮藏】2℃-8℃冷藏，干燥、密封、避光贮藏。

五.【规格】50L/包

六.【有效期】二年

备注：

本产品成分为化学结构明确的物质，无动物来源物质。

以上是M199培养基的产品说明，一般来说，用粉剂配的M199细胞培养基可选用蔡氏滤器，milippore的滤器也是不错的选择，如果实验室条件不允许的话，跟正常培养基一样过滤问题也不大。