消化系统药理实验中的选择与应用

 

四、消化系统药理实验中的选择与应用

（一）消化系统分泌实验

1．胃液分泌实验 胃液收集常选用狗和大白鼠。由狗右侧嘴角插入胃管收集胃液，大白鼠则需剖腹，从幽门端向胃内插入一直径约3mm的塑料管，在紧靠幽门处结扎固定，以收集胃液，可进行胃酸的测定和胃蛋白酶的测定。

2．胰液分泌实验 胰液收集可选用狗、兔或大白鼠。在全麻下进行手术，狗在主胰管开口十二指肠降部，距幽门12cm左右处，要将十二指肠翻转，在其背面即可找到。兔的胰腺很分散，胰管位于十二指肠的升段，距离幽门约17cm左右处。分别向主胰管内插入细导管收集胰液。大白鼠的胰管与胆管汇集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，就可分别收集到胆汁和胰液。大白鼠的胰液很少，插入内径约0.5mm的透明导管后，以胰液充盈的长度作为观察胰液分泌的指标。慢性实验时可选用狗作胰瘘手术后收集胰液。

3．胆汁分泌实验为了观察某些药物对泌胆、排胆以及存在于胆系内结石的影响，需要研究用药前后胆汁流量及其成分的变化。胆汁可分别给动物作胆囊瘘和总胆管瘘收集。胆囊瘘常选用狗、猫、兔和豚鼠进行，而以狗为佳。在全麻下进行手术，以右肋缘下横切口的暴露最为满意。如欲观察肝胆汁的分泌情况需要结扎胆囊管或选用大鼠，因后者无胆囊，所以作总胆管造瘘手术常选用大白鼠。收集胆汁后可进行各种胆汁的化学分析。

（二）消化系统运动实验

　　1．动物离体标本实验消化道平滑肌具有肌源性运动的特点，动物离体的肠段、胆囊、乃至胃肠肌片，只要具有合适的存活环境就可保持其运动机能。这是药理学研究中常用的一种离体 实验方法 ，这具有实验条件较易控制、操作较简单、用一般仪器设备即能工作等优点，从而应用较广。

标本制备大都选用兔、豚鼠、大白鼠等动物的组织，也可利用手术中取下或猝死剖检时取下的消化道器官进行实验。

　　取禁食24小时的动物，通常用击头致毙法处死，以避免麻醉或失血等对胃肠运动机能的影响。立即常规剖腹，取出所需的胃、肠、胆囊等，去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放在充氧（或含5%CO ₂ ）、保温（37℃）的保温液中，并以注射器用保温液将管腔内的食物残渣洗净。操作时动作要轻柔，冲洗时不宜采取高压以免疫组织挛缩。

若以肌片为标本，一般剪取1～5mm宽，1～2cm长的一段即可。若用动物的肠管做实验时，通常取十二肠或回肠。十二指肠的兴奋性、切律性较高，呈现活跃的舒缩运动。回肠运动比较静息，其运动曲线的基线比较稳定。所用的标本大都取1.5cm左右一段即可。以狗的胆囊做实验时可截取4mm宽，2cm长的全层肌片。兔、豚鼠等的胆囊较小，取材时常与胆管一起摘下。兔的胆囊可沿其长轴一剖为二，豚鼠则可以整个胆囊或取其半进行实验。做胆管的离体实验量，通常取狗的总胆管，将相联的十二指肠组织切除，留下乳头以及胆道末端括约肌组织。

离体胃、肠运动的电活动，除了峰形电位外还可记录到周期性的慢波。它们在胃肠道的不同部位以及不同种属的动物间存在一定差异（见表10-32）。

表10-32　离体胃肠组织的慢波频率（次/分）

组　　　织

人

狗

猫

胃

3

5

4

十二脂肠

12

18

18

空　　肠

10

17

16

回　　肠

8

10

12

2．消化器官运动在体实验 利用整体动物观察消化道动物的方法很多，诸如肠管悬吊法、内压侧定法、生物电记录法、腹窗直视法以及X线检查等等。这�方法各有所长，也各有其不足之处，在进行药理研究时可以酌情选用。

常选用狗、猫或兔，择其健康成年者，性别不构。由于巴比妥麻醉剂对消化道运动有抑制作用，故有些作者用猫或兔做实验时，愿意用乌拉坦1.0～1.5g／kg静脉或腹腔注射进行麻醉。观察胆道系统的运动则以母狗为佳，因为肋弓角较大容易暴露。在禁食12～24小时后进行实验。

进行胆道口括约肌部胆道内压测定实验时，大都选用狗或猫，也可用兔。狗的胆道位置较深，要求良好的手术暴露。猫的总胆管相对地较粗，操作也较容易，但手术耐受性稍逊于狗。兔的总胆管容易瓣认，壶腹部明显地呈现于十二指肠第1段的表面，但组织纤维，操作时务必仔细。狗的总胆管粗约2～3mm，位于十二指肠降部、循小网膜右缘而下，在下腔静脉之前、门脉之右。

（三）催吐、镇吐、厌食实验

1．催吐和镇吐实验常选用狗和猫做实验。给狗皮下注射盐酸阿朴吗啡1mg/kg；注后2～3分钟就可以引起恶性呕吐。用1%硫酸铜或硫酸亚铅溶液50ml给狗灌胃，约2～3分钟后也可引起呕吐，但几乎无恶性现象。

2．厌食实验 这是防治肥胖病及其并发症的研究内容之一。可以选用狗、猫、大鼠、小鼠等进行实验，猴因有颊囊，且有精神因素参与，故选用者不多。狗容易呕吐，也有行为因素，故也不理想。一般多选用大白鼠。

（四）消化系统常见病动物模型

1．胃病 急性胃炎的实验模型常选用大白鼠。实验前禁食24小时，以水杨酸制剂（如20ml的阿司匹林或水杨酸溶液）按100mg/kg给药，或以10ml的醋酸或不同浓度的盐酸（1、10、100ml），或同种动物胆汁、2ml的牛磺胆酸、15%的乙醇等单独或几种合用灌胃，4小时后动物胃内发急性弥慢性炎症变化。

　　 慢性胃炎 的实验模型常选用慢性胃瘘狗，每日经瘘灌70～75℃的热水300ml，连续60天后可引胃粘膜萎缩，胃酸减少甚至缺失。还可用同种或自身的胃液（按4～5ml/kg取胃液，并浓缩50倍），或胃粘膜的生理盐水的组织匀浆与Freund佐剂以1：1配成乳剂，皮下注射进行免疫，隔15～30天再注射一次，即可诱发致胃粘膜发生细胞浸润及萎缩 性病 变。

　　急性 胃溃疡 的实验模型常选用200～250g的成年大白鼠，用浸水刺激造成应激性溃疡。

　　结扎大白鼠幽门可诱发成 胃溃疡 ，其成功率与动物禁食情况以及结扎后经历的时间等有关。一般诱发成功率达85～100分，是最常用的模型之一。

　　组织胺法常选用雄性白色豚鼠，禁食18～24小时，全麻下找出十二指肠，在十二脂肠的胆管开口上方夹一动脉夹造成狭窄，以使胃液潴留并防止十二脂液返流入胃。皮下注射磷酸组织胺水溶液（2.5～7.5mg/kg，根据动物品种而剂量不同），1小时后即可恒定地复制出 胃溃疡 。

　　慢性 胃溃疡 的实验模型常选用大白鼠。可用热烙法或醋酸浸溃造成胃壁损伤形成溃疡。热烙法是在无菌剖腹后，以3mm粗的15W电烙铁加热至45℃左右，灼烙腺胃约5秒种后粘膜出现水肿，6小时后有明显出血。醋酸浸溃法可用10%或20%醋酸溶液0.05ml，用0.01ml刻度的结核菌素注射器利用26号皮内针头作胃壁粘膜注射或以棉签蘸100％醋酸溶液通过内径5mm的玻璃管涂敷胃浆膜面或剖开胃腔涂于粘膜面引起腐蚀性溃疡。

2．肠病 肠梗阻实验模型常选用狗。在单纯结扎肠管24小时后，即可见梗阻以上肠段明显扩张。也可采取结扎肠系膜血管、人工造成肠套或肠扭转等方法复制。

肠粘膜实验模型通常选用狗，不能选草食动物，因其阑尾无论在结构或机能上均与人的阑尾有较大差别。狗虽也差别，但狗的阑尾粗而长，容易处理。

溃疡性结肠炎实验模型可以选用大白鼠，通过免疫方法制备。一般是用同种或异种动物的结肠粘膜匀浆加Freund佐剂，给