Hygromycin B的基本性质和贮存
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潮霉素是由链霉菌产生的氨基糖苷类抗生素。潮霉素分为两种,其中的潮霉素B(Hygromycin B)起初被作为动物用药加入饲料中,20世纪80年代后开始应用于基因筛选等实验中。
潮霉素是由链霉菌(Streptomyces hygroscopious)产生的氨基糖苷类抗生素。潮霉素有A,B两种组分。潮霉素A:白SF末,熔点105~109℃,旋光度[α]D25-126°(c=1,水)。易溶于水与甲醇,不溶于非极性溶剂。对金葡菌209P、肺炎杆菌与人型结核杆菌的最小抑菌浓度MIC为25、12.5与1.56μg/ml,对沟端螺旋体、支原体亦有作用。实验室用的潮霉素一般为潮霉素B(Hygromycin B)。
潮霉素B在20世纪50年代被发现,当时用作动物用药。而现在它仍然作为驱虫抗虫药被加入鸡和猪的饲料中。用于产生潮霉素的吸水链霉菌在1953年被首次从土壤中分离并获得纯培养。潮霉素B相关的抗性基因发现于20世纪80年代早期。
潮霉素B与大多数氨基糖苷类抗生素一样,通过抑制蛋白质的合成来阻止微生物 生长。它可以稳定核糖体大亚基上的tRNA结合位点,导致空载tRNA不能脱离核糖体,抑制了翻译的继续进行,潮霉素的抑制作用对于原核细胞与真核细胞的核糖体都是有效的。
在实验室中,潮霉素B被用于选择和保持拥有潮霉素抗性基因的原核和真核细胞。潮霉素抗性基因编码一个激酶(潮霉素激酶),它通过磷酸化潮霉素B使其失活。自从潮霉素的抗性基因被发现以来,潮霉素B就被用来作为转基因实验中的标准筛选方法。目前植物 组织培养中常用潮霉素B进行筛选。
潮霉素B的基本性质:
英文名称:Hygromycin B
分子 式: C20H37N3O13
相对分子质量 :527.52008 [g/mol]
PubChem: 35766
pKa:7.1 and 8.8
熔点:160-180℃
保存条件:2~8℃,避光
<center> <img alt="Hygromycin B的基本性质和贮存" height="300" src="http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/08/27/A1377591419.png" width="300" /></center>简介:Hygromycin B is a unique aminoglycoside antibiotic that inhibits the growth of prokaryotic (bacteria) and eukaryotic microorganisms (yeasts) and mammalian Cell s. Inhibits protein synthesis at the translocation step on the 70S ribosome and causes misreading of the mRNA. Hph, a gene from E. coli, encodes resistance to hygromycin B and can be isolated and cloned by recombinant DNA techniques. This hygromycin B-resistance gene is particularly useful for identification or selection of recombinant clones in a variety of cell types. Hygromycin B penetrates cells that have been permeabilized by virus infection and can hence act as an effective antiviral agent. (大肠杆菌天然有一定抵抗潮霉素的能力)
工作浓度: 原核生物(e.g., E. coli, at 100 mg/ml); 低等真核生物(e.g., yeast, at 200 mg/ml) 以及高等动物 (e.g., mammalian cells in culture, 150-400 mg/ml)
溶液配制及保存:Hygromycin B具有水溶性, 浓度 >50 mg/mL, 2-8℃的条件下,其水溶液可贮存5年以上。潮霉素B亦可溶于甲醇或乙醇。Hygromycin B溶液需要过滤除菌,不可高温灭菌
热稳定性:在37℃ 到60℃条件下,Hygromycin B水溶液可至少保存一个月。