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常用药品试剂和培养基的配制——培养液和培养

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(四)培养液 ,培养基

1、人造海水

配方一

氯化钠( ) 24.72克

氯化钾( ) 0.67克

氯化钙( ) 1.36克

氯化镁( ) 4.66克

硫酸镁( ) 6.29克

碳酸氢钠( ) 0.18克

蒸馏水 加到1升

把上述各种盐溶解在少量蒸馏水中,再加入碳酸氢钠,最后用蒸馏水稀释到1000毫升。

配方二

氯化钠 45.0克 硫酸镁 0.1克

氯化镁 5.0克 氯化铁(1%溶液) 1滴

先把硫酸镁、磷酸一氢钾、氯化铁用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到980毫升。随后取硝酸钙溶解在20毫升蒸馏水里,把此溶液逐滴加到上述溶液内,装瓶保存。

配方二 克诺普氏(Knop’s)溶液

硝酸钾 1克 硫酸镁 1克

磷酸二氢钾 1克 硝酸钙 3克

先把硝酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钾用少量蒸馏水溶解,加蒸馏水到980毫升。随后取硝酸钙,用20毫升蒸馏水溶解,加入到上述溶液内。溶液灰形成白色沉淀,在使用是必须摇动。

在以上溶液中加入蔗糖溶液(1~4%),能刺激某些藻类形成游动孢子。该液用于培养绿藻。

3、植物无土培养液

配方 霍格伦德(Hoagland)和斯纳德(Snyder)液

硝酸钙 0.821克 硝酸钾 0.506克

磷酸二氢钾 0.136克 硫酸镁 0.120克

酒石酸铁 0.005克

把上述盐类溶解在少量蒸馏水里,然后稀释到1000毫升。

 

(五)培养基

1、细菌培养基

配方一 牛肉膏琼脂培养基

牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克

氯化钠 0.5克 琼脂 1.5克

水 1000毫升

在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。

配方二 马铃薯培养基

取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。

配方四 根瘤菌培养基

葡萄糖 10克 磷酸氢二钾 0.5克

碳酸钙 3克 硫酸镁( ) 0.2克

酵母粉 0.4克 琼脂 20克

水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升

先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。

2、放线菌培养基

配方一 淀粉琼脂培养基(高氏培养基)

可溶性淀粉 2克 硝酸钾 0.1克

磷酸氢二钾 0.05克 氯化钠 0.05克

硫酸镁 0.05克 硫酸亚铁 0.001克

琼脂 2克 水 1000毫升

先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.2~7.4,分装后灭菌,备用。

配方二 面粉琼脂培养基

面粉 60克 琼脂 20克

水 1000毫升

把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟。另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。

3、真菌培养基

配方一 萨市(Sabouraud’s)培养基

蛋白胨 10克 琼脂 20克

麦芽糖 40克 水 1000毫升

先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。

本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。

配方二 马铃薯糖琼脂培养基

把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。

把这培养基的pH值调到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。

配方三 黄豆芽汁培养基

黄豆芽 100克 琼脂 15克

葡萄糖 20克 水 1000毫升

洗净黄豆芽,加水煮沸30分钟。用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到1000毫升,分装,灭菌,备用。

把这培养基的pH值调到7.2~7.4,可用来培养细菌和放线菌。

配方四 豌豆琼脂培养基

豌豆 80粒 琼脂 5克

水 200毫升

取80粒干豌豆加水,煮沸1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用。

4、食用菌菌种培养基

配方一 马铃薯—蔗糖--琼脂培养基

20%马铃薯煮汁 1000毫升

蔗糖 20克 琼脂 18克

把马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取马铃薯小块200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后,过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升,即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。使用该培养基对pH值要求不严格,可以不测定。

配方二 综合马铃薯培养基

20%马铃薯煮汁 1000毫升

磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克

葡萄糖 20克 维生素 10毫克

琼脂 18克

先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。

该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。

 

(责任编辑:大汉昆仑王)
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