胃粘膜幽门螺杆菌感染检测方法对比研究

 

胃粘膜幽门螺杆菌感染检测方法对比研究

　　自1983年澳大利亚学者Warren和Marshall报告在人胃粘膜活检组织中分离出幽门螺杆菌（Helicobacter pylori・Hp）以来，国内外学者对Hp和上消化道，尤其是胃和十二指肠疾病的关系，有关Hp感染的检测方法等问题进行了大量研究和报道，并取得了一定成果；目前多数学者公认Hp感染与 慢性胃炎 、消化性溃疡的发生、治疗及预后有着重要关系，因此研究Hp感染的检测方法；如何提高Hp感染检出率，是当前学者研究的热点，并提出了快速尿素酶药盒检测法、活检胃粘膜印片法及病理切片各种染色光镜检查法、血液Hp培养法、抗Hp抗体检测法，尿素酶呼吸试验法、聚合酶链反应（PCR）扩增尿素酶A或B基因检测法等；但上述方法中，有些价格昂贵、操作复杂，有些费时费事，故很难在广大基层医院推广。本研究的目的在于对一般基层医院能开展的快速尿素酶法、胃粘膜印片法、病理切片染色检查法进行对比研究，试图寻找出能提高Hp感染阳性检出纱的互补方法，并对大津科锐公司生产的快速尿素酶 试剂 盒进行评价，从而有利于使更多医院能对Hp与上消化道疾病的关系进行临床研究。

1　对象和方法

1.1　对象

　　本研究组为1995―04～1996―02―01，因具有各种上消化道症状到本院消化内科门诊就诊及在消化内科信�的病人共100例，其中男73例、女27例，年龄在18岁～80岁，平均年龄44.7岁。经纤维内镜直观及活组织病理检查证实：慢性萎缩性胃炎43例、十二指肠球部溃疡27例、 胃溃疡 3例、病程在0.5a～30a；所有病人均在多所医院治疗并均正在服用质子泵抑制剂、H ₂ 受体阻滞剂，各种铋剂、中药，少数病人曾服用过羟氨苄青霉素，痢特灵、庆大霉素等药物；对上述病人不加选择全部进入本研究组。

1.2　方　法

首先于胃镜检查时均于距幽门口3cm～5cm处取活组织1～2块，同时用尿素快速检测法、印片法、病理切片染色法检查胃粘膜Hp感染情况；其次于病变明显处取活组织2～4块做病理组织学检查，以协助胃镜直观所见做出正确临床诊断；Hp检测的三种具体方法是：快速尿素酶法――将两滴试剂滴入反应板孔中，再将所取的胃粘膜块放入其中，观察5min，如变为红色者为阳性，不变色者为阴性（本研究试剂盒由天津科锐公司提供）；粘膜印片法――将所取之粘膜用钳子钳好，以其粘膜面对准清洁玻片反复印片，待玻片印片处干燥后用1％中性红染液1～2滴滴于该处，染色5min后蒸馏水缓缓将染液冲去，自然干燥，加盖玻片封存，在光镜下可见呈弯曲状或S状、红色幽门螺杆菌（此法先于快速尿素酶法，将印片后的组织再做快速尿素酶检测用）；病理切片染色法――对所取之粘膜先用10％福尔马林固定、切片、美蓝染色、透明中性表封固在光镜下可见直径为0.3μm～0.5μm1，长1.0μm～1.5μm，弧形或S形的幽门螺杆菌。

2　结果

本组100例病人快速尿素酶法Hp阳性者31例、粘膜印片法阳性者47例、病理切片美蓝染色法阳性者44例，阳性检出率分别为31％，47％及44％，天津科锐公司提供的快速尿素酶试剂盒检测Hp结果的病理切片（“金标准”）对比，快速尿素酶法假阴性13例、假阳性2例，印片法＋病理检查法阳性者共50例、阳性检出率可达50％；详情见表1。天津科锐公司提供的试剂盒做快速尿素酶试验在同样病人检出Hp感染的阳性率低于印片法及病理检查法。和后两种方法比较有一定差异（P＜0.05，表1）。

表1　三种方法检测100例病人胃粘膜Hp感染结果　（n：100）

方　　法

阳性例数

阳性率

快速尿素酶法

31

31％

粘膜印片法

47

47％

病理切片染色法

44

44％

三种方法对受检之100例病人中共5种疾病，其结果不尽相同，但均以十二指肠球部溃疡Hp感染检出阳性率最高，快速尿素酶法为40.7％、印片法为63.0％、病理染色为55.6％，平均为53.1％（表2）。

表2　三种方法与五种疾病胃粘膜Hp感染检出情况

疾病种类

n

快速尿素酶法

印片法

病理美蓝染色法

阳性数

阳性率(％)

阳性数

阳性率(％)

阳性数

阳性率(％)

浅表性胃炎

24

4

16.60

8

33.33

7

29.16

萎缩性胃炎

43

14

32.58

20

46.51

20

46.51

十二指肠溃疡

27

11

40.74

17

62.60

15

55.55

胃溃疡

3

1

33.33

1

33.33

1

33.33

胃癌

3

1

33.33

1

33.33

33.33

3　讨论

　　为进一步研究Hp感染与上消化道一些疾病的关系，提高诊断治疗效果，近十多年以来，国内学者在Hp的研究中，对Hp检测方法的研究十分重视；大量国内外文献一致认为：快速尿素酶试验法、血液Hp培养法、活检胃粘膜切片各种染色光镜检查法、抗Hp抗体检测法、尿素酶呼吸试验法、聚合酶链反应扩增尿素酶基因检测法，其特异性强、敏感度高可做为检测Hp感染的“金标准”（Gold Standard）近些年提出的“活检胃粘膜印片法”，其特异性、敏感性、阳性检出率也较高，可在临床推广应用；方法虽多，但仍以聚合酶链反应扩增尿素酶基因检测法之特异性、敏感度最高，分别为100％及96％～98％，且可用於唾液、胃液、粪便中Hp检测。遗憾的是这些方法，价格昂贵、操作持技术复杂、费事费时，难於在基层医院广泛开展。其它方法由於特异性差或敏感性低，故其阳性检出率低，甚致出现假阴性或假阳性。张家滨等在1603例快速尿素酶检测中 慢性胃炎 阳性率为55％和贾博琦报告的54