ABO血型鉴定和交叉配血实验

[实验目的]
　　观察红细胞凝集现象。
　　学习ABO血型鉴定方法，掌握血型鉴定原理。
[实验原理]
　　ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型，存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素，B型标准血清中含有抗A凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应，以确定其血型。
　　同种动物不同个体的红细胞凝集称为同族血细胞凝集作用。不同动物的血液互相混合有时也可产生红细胞凝集，称为异族血细胞凝集作用。对于动物的天然血型抗体了解不多，而且免疫效价也很低，所以同种动物第一次输血，一般不会引起严重后果。但第二次输血就必须进行交配试验，才能决定是否能相互输血。
[实验对象]
　　正常人。
[实验药品]
　　A型B型标准血清。
[ 仪器 器械]
　　双凹玻片，采血针，竹签，75%酒精棉球，干棉球，玻璃蜡笔（记号笔），尖头滴管，显微镜。
[实验方法与步骤]
　　1.ABO血型的鉴定：
　　（1）取双凹玻片一块，在两端分别标上A和B，中央标记受试者的号码。
　　（2）在A端和B端的凹面中分别滴上相应标准血清少许。
　　图6.9-1 ABO血型鉴定示意图
　　（3）75%酒精棉球消毒无名指端，用采血针刺破指端，用消毒后的尖头滴管吸取少量血（也可用红细胞悬浮液，见下述），分别与A端和B端凹面中的标准血清混合，放置1～2 min后，能肉眼观察有无凝血现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。
　　（4）根据凝集现象的有无判断血型（图6.9-1）。
　　2.交叉配血实验
　　（1）分别对供血动物和受血动物消毒、静脉取血，制备成血清和红细胞悬浮液。红细胞悬浮液是将受检者的血液一滴，加入装有生理盐水约1 ml的小 试管 中，即为2%的红细胞悬浮液。加盖备用。
　　（2）取双凹玻片一块，在两端分别标上供血动物和受血动物的名称或代号，分别滴上它们的 血清 少许。
　　（3）将供血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴到受血者的 血清 中（称为主侧配血,图6.9-2）；将受血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴入供血者的血清中（称为次侧配血），混合。放置10～30 min后，肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。如果两次交叉配血均无凝集反应，说明配血相合，能够输血。如果主侧发生凝集反应，说明配血不合，不论次侧配血如何都不能输血。如果仅次侧配血发生凝集反应，只有在紧急情况下才有可能考虑是否输血。
[注意事项]
　　1.指端、采血针和尖头滴管务必做好消毒准备。做到一人一针，不能混用。使用过的物品（包括竹签）均应放入污物桶，不得再到采血部位采血。
　　2.精消毒部位自然风干后再采血，血液容易聚集成滴，便于取血。取血不宜过少，以免影响观察。
　　3.采血后要迅速与标准血清混匀，以防血液凝固。
　　4.在进行交叉配血实验时，一定要防止将主侧配血和次侧配血搞混了。
[实验结果]
　　报告你的血型。