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血液凝固及影响血液凝固的因素

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目的和原理 】  
血液凝固(blood coagulation)过程可分为三个阶段:因子X的激活,凝血酶原激活成凝血酶,纤维蛋白原转变为纤维蛋白。由于激发凝血反应的原因和参与反应的物质不同,因子X的激活可以分为内源性和外源性两条途径。如果直接从血管中抽血观察血液凝固,此时因血液几乎没有组织因子参与,其凝血过程主要由内源性途径(intrinsic pathway)所激活。组织因子(tissue factor,TF)启动外源性途径(extrinsic pathway)。本实验的目的是通过测定各种条件下血液凝固所需的时间,了解血液凝固的基本过程及其影响因素。
实验材料
家兔;清洁小 试管 ( 10×7.5mm)8支、50ml小烧杯2个、100ml烧杯三个、10ml注射器、5号针头、滴管、 试管 架、恒温 水浴 器、哺乳动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、带橡皮刷的玻棒或竹签、棉花;20%氨基甲酸乙酯、生理盐水、肝素8单位(置小试管内)、草酸钾l~2mg(置小试管内)、石蜡油、碎冰块、肺组织浸液(取兔肺剪碎,洗净血液,浸泡于3~4倍量的生理盐水中过夜、匀浆离心、过滤,收集的滤液即肺组织浸液,存入冰箱备用)。
实验步骤
    兔颈总动脉插管采血  从兔耳缘静脉缓慢注入20%氨基甲酸乙脂(5ml/kg),待其麻醉后背位固定于手术台上。剪去颈部的毛,正中线切开颈部皮肤约5~7cm,分离皮下组织和肌肉,暴露气管,在气管两侧的深部找到颈总动脉,分离出一侧颈总动脉,远心端用线结扎阻断血流,近心端夹上动脉夹,用利剪作一斜切口,向心脏方向插入动脉插管,用丝线固定。需放血时开启动脉夹即可。
结果整理及分析
1.影响血凝的因素
实验条件                             凝血时间(min)
①试管内放入血液2ml(对照)
②试管内放少量棉花,并放入2ml血液 
  ③用液体石蜡涂试管内表面,并放入2ml血液
  ④试管内放2ml血,保温于37℃的 水浴 中
  ⑤试管内放2ml血。将其放入冰块中
  ⑥试管内放入肝素,再放入2ml血,并将其混匀
  ⑦试管内放lmg草酸钾,再放入2ml血后混匀
⑧制备组织因子,取0.3ml,取血2ml放入试管混匀
每隔15秒,倾斜一次试管,观察血液是否凝固。将结果填入表中。
2.用小 烧杯 ,放入血10~20ml,用毛刷搅拌。观察 烧杯 中血液是否凝固,毛刷用清水冲洗,观察上面留下了什么?
注意事项
1.      试管 编号必须记清楚。
2.     准备好各 试管 按顺序连续放血。
3.     每管凝血时间的计时应从血液放入该管开始。
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