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T迷宫实验注意事项及检测方法

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1.  注意事项

①大鼠和小鼠具有良好的空间辨别功能,能很快学会并准确操作迷宫。因此,T-形迷宫和放射臂迷宫均被广泛用于测试动物的空间记忆能力。T-形迷宫用于研究不同脑区对空间记忆的影响。它对某些脑结构,尤其是海马的毁损作用敏感。此外,许多药物或毒素都可增强或削弱动物在T-形迷宫的空间记忆。实验所用的动物除大鼠和小鼠外,还包括猪、羊、乌龟和鸽子等。
②动物选择的准确性与两次选择之间的间隔及每一训练间期内的选择训练次数等有关。正常动物经短时间的间隔(例如5s),其选择准确性非常高。而经过极长时间的间隔(例如超过1h),其选择接近随机性操作。强迫选择训练后。如只给一次目标臂选择,准确性通常很高。但是,如给予多次选择,则选择次数越多,准确性越差。
③啮齿类动物有单向偏爱的特性。这种单向偏爱与动物种属和品系有关。例如,C57BL/6J小鼠、ICR小鼠和Purdue-Wistar大鼠更偏爱左侧,而Spague-Dawley大鼠和Wistar大鼠更偏爱右侧。研究表明,超过2/3的雄性Spague-Dawley大鼠偏爱右侧,而偏爱左侧的不到1/5。这种单向偏爱可影响对动物学习记忆的评价。
④主干臂的闸门是T-形迷宫的重要特征。它既可用于在两次选择之间将动物限制在起始箱内一定的时间,也可防止动物在两次选择训练之间探究迷宫。因此,两次选择训练之间应将动物迅速放回主干臂内的起始箱。这一点很重要,它可确保动物不会去探究对侧目标臂。
⑤当动物对迷宫或实验者的应激恐惧超过其对探究和觅食的渴望程度时,动物对迷宫的探究减少,甚至呆在迷宫某处不动而不去探究迷宫。这种恐惧表现为 动物在迷宫内排便和排尿;当抓它时,动物还会发出尖叫声。因此,足够的应激适应是必要的。否则,如果动物在迷宫内不进行臂的选择,就无从得知它的记忆力是 正常还是减弱。

2、实验测试

(1)T迷宫外观呈“T”形,由一个主干和两个选择臂构成,主干长为60cm,每个臂为30cm长、10cm宽、20cm高。在两个选择臂的末端各有1个食物杯,用来放食物(本实验所用的奖励食物为向日葵籽),在选择臂的近端有一可抽拉的挡板。迷宫全黑色,使小鼠在获取食物奖励时没有任何参考,只能根据自我判断选取正确的食物摆放的一端。为增加小鼠寻觅食物的动力,在测试前3d对小鼠食量进行限制(禁食6 h),使其体重下降至正常获取食物时的80%-90%。且测试前2d各进行1次训练,让小鼠在迷宫内熟悉环境数分钟,使它们能找到食物。
(2)实验在安静的房间内进行,环境条件保持稳定。在测试时,第一步先将迷宫的一个臂挡住,只允许动物到达T迷宫的另一个臂,在此动物得到食物;在第二步,将T迷宫的两臂都开放,但只有原来被挡住的臂内有食物,小鼠只有选择进入与第一步方向相反的臂才能得到食物,记为1次正确,如小鼠重新进入第一步实验时去过的臂记作1次错误。如此两步为一组,两步实验间隔15 s。每只小鼠每天进行 10或15组实验,记录其正确选择次数,共测3 d。
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