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细菌分布及外界因素对细菌影响的检测

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一、自然沉降法 检查空气中的细菌
【材料】
普通琼脂平板。
【方法】
取普通琼脂平板一个,打开皿盖,让培养基直接暴露于空气中,置于实验台上或需要测定的地方15~30分钟。盖上皿盖,用记号笔或蜡笔注明放置地点、实验日期和实验者班级、姓名等,放入37℃温箱培养18~24小时,观察细菌的生长情况和数量。并分析其意义。
二、倾注法检查水中的细菌
【材料与方法】
1. 用无菌吸管吸取胜0.5ml水样加入肉汤培养基中。
2. 另取一支未接种的肉汤管做对照,与上管一起置于37℃温箱培养18~24小时,观察结果。
【结果】
对照管应透明清亮,试验管变混浊,说明水样中有活菌存在。并可通过比浊法估计细菌生长繁殖后的数量。
三、人体体表及各种物品表面的细菌检查 — 拭子法和涂抹法
【材料】 普通琼脂平板。
【方法】
取普通琼脂平板一个,在平板底面用记号笔或蜡笔将平板分成若干等份,于每份培养基表面分别用手指、衣物、书本、笔等轻轻涂抹(不要擦破培养基)。也可用无菌生理盐水擦洗衣物等,用无菌棉拭子涂于培养基表面,盖上皿盖,分别标记清楚。置37℃温箱培养18~24小时观察结果。观察各种物品中细菌的数量及类别,并分析其意义。
【注意事项】
本实验检出的除细菌外,尚可能有真菌、放线菌等,请注意加以区别。
四、人咽喉部位的细菌检查
【材料】 血液琼脂平板。
【方法】
1. 咳碟法
取血液琼脂平板一个,打开皿盖,将培养基面置于口腔前约10厘米处,用力咳嗽数次(让飞沫落在培养基表面),然后盖上皿盖,注明被检查者姓名、实验日期等。置37℃培养18~24小时观察结果。观察细菌的数量、种类等,注意是否有溶血环,并分析其意义。
2. 试子法
用无菌棉签涂取扁桃腺两旁的分泌物,在血琼脂平板表面涂布成线,然后改用接种环,作分区划线接种,置37℃培养18~24小时观察结果。观察细菌的数量、种类等。注意是否有溶血环,并分析其意义。
五、化学因素对细菌的影响(化学消毒剂的杀菌试验)
【材料】
1. 菌种:葡萄球菌18~24小时琼脂斜面培养物。
2. 培养基:普通琼脂平板。
3. 化学消毒剂:5%石炭酸、2%碘酒、70%酒精、0.1%升汞。
4. 其他:直径0.6cm无菌圆形滤纸片、小镊子、接种环等。
【方法】
1. 将琼脂平板分为四等分,并在其底面做标记。
2. 用接种环取葡萄球菌琼脂斜面培养物,密涂于整个琼脂培养基表面。
3. 用小镊子夹取无菌小滤纸片,分别蘸取上述消毒剂(消毒剂不宜蘸得过多,防止外流)。平贴于各相应分区的中央,盖上皿盖,标明日期和试验者。
4. 置37℃培养18~24小时后观察各种化学消毒剂的杀菌作用。纸片周围无细菌生长的区域,称为抑菌圈,分别测量四种消毒剂抑菌圈的直径,以毫米为单位记录之。

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