细菌的分布及外界因素对细菌的影响

一、细菌的分布：
微 生物 种类繁多，繁殖迅速，分布广泛，不论自然界的空气、土壤、水，生活中的食物、各种物体和器械表面，以及动物和人的皮肤粘膜、与外界相通的腔道中都广泛存在着数量极其庞大的各种微 生物 ，其中以细菌、放线菌最多。因此，了解微生物在自然界及正常人体的分布，对于在医疗实践及某些科学实验中树立无菌观念有着重要的意义。
（一）空气中细菌的检查（设计性实验选题）
（二）水中细菌的检查（设计性实验选题）
（三）人体皮肤表面细菌的检查（设计性实验选题）
【附录】细菌菌落的计数方法
①选择生长均匀，无片状菌苔生长的平皿观察。一般先用肉眼观察，用记号笔在平板底上进行点数（以免遗漏），然后再持放大镜检查有无遗漏的微小菌落。
②如菌落多而密集，可用分区法或菌落计数器计数。分区法是用记号笔在平皿底部通过圆心做垂直线，分为 四区，再分别选择菌落密集和稀疏的两个区，再做平分线，使每一小区为平皿面积的1／8 或1／16，然后再分别挑选菌落稀疏和密集的两小区 进行计数，所得数乘以8或16，即为该平皿的菌落总数。（图４-1）
③简易的菌落计数器是一块玻璃板上刻划有144 个面积为1平方厘米的正方形小格。将长有菌落的培养皿放上，计算10个小方格内的菌落数，如为30个，则平均1小方格为3个菌落。若培养皿直径是9厘米，则半径为4.5厘米，整个培养皿上的菌数是3个×3.1416×（4.5） ² =191个菌落。

二、外界因素对细菌的影响
微生物和外界环境有密切的关系，当外界环境适宜就能进行正常的新陈代谢生长繁殖；当外界环境条件发生巨大改变，可导致微生物的主要代谢活动发生障碍，生长停顿，甚至死亡。在医学上常用人工的方法造成对微生物不利的环境，来抑制或杀灭微生物，以达到消毒灭菌的目的。其方法大致可分为物理、化学和生物三大类。
（一）物理因素对细菌的影响
1、温度对细菌的影响
2、紫外线杀菌试验
（二）化学因素对细菌的影响
化学消毒剂的杀菌作用
（三）生物因素对细菌的影响
噬菌体的特异性裂解细菌试验
【材料】大肠杆菌、痢疾杆菌的肉汤培养物、痢疾杆菌噬菌体、普通肉汤、普通琼脂平板。
【方法】
（1）将琼脂平板划分成三等份，注明1、2、3。
（2）分别以接种环取菌后，在1、3处涂布痢疾杆菌，2处涂布大肠杆菌。

（3）分别沾取一接种环的痢疾杆菌噬菌体加于1、2处中央，（注意不要交叉污染），另取一接种环的肉汤放于3处中央。
（4）置37℃孵育24小时后取出，观察噬菌斑出现的位置（见图4-2），并记录之。
（四）细菌对抗生素的敏感性试验---纸片扩散法
　　又称Bauer-Kirby法。是将干燥的浸有一定浓度抗菌药物的滤纸片放在已接种一定量某种细菌的琼脂平板上，经培养后，可在纸片周围出现无细菌生长区，称抑菌圈。测量抑菌圈的大小，即可判定该细菌对某种药物的敏感程度。体外药敏结果可作为病人治疗选用药物的参考。
【材料】金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌18～24小时培养物、普通琼脂平板、小镊子；含有青霉素、庆大霉素、红霉素、复合磺胺、链霉素等抗生素的干燥滤纸片。
【方法】
（1）将金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌培养物密集均匀地涂布整个平板。
（2）将含有抗生素药物的滤纸片用烧灼灭菌的镊子分别贴于平板表面，相互间应间隔一定距离。
（3）37℃培养24小时后，观察结果。
【结果】
根据药物纸片周围抑菌圈直径的大小来判断该菌对各种药物的敏感程度。判断标准见表4-1
（五）中草药对细菌的抑菌作用测定