细菌的分离培养、纯培养和生化试验

一、目的

掌握细菌培养、纯培养与基本微生物操作技能，了解生化试验原理、方法和意义。

二、实验内容

（一）细菌的分离培养：倾注法和划线法（倾注法：此法很少应用）本次试验采用前一种方法）划线法：

融化普通琼脂培养基，倒平板，杂检。取1号菌如图1之一方法划线，37℃培养24h。

图1 细菌分离培养的划线法

图2 细菌纯培养划线方法
(二) 钓菌和纯培养：观察菌落，选单个菌落，标记后，钓取目的菌落，如图2之一方法接种于普通琼脂斜面上，37℃培养24h。
（三）生化实验
1、糖发酵实验：原理。将糖发酵管甩至两端，标记后折断，每组将1.2菌接种于两套糖发酵管中，倒立37℃培养24h。
2、靛基质实验：原理。每组将2、3号菌接入蛋白胨水培养基中，37℃培养4天后，加入靛基质 试剂 ，观察结果，
3、VP、MR实验：原理。每组分别将1、2号菌接入2管葡萄糖蛋白胨中，37℃培养2天分别加入VP、MR 试剂 ，观察结果。
4、H2S实验：原理。每组分别将1、2号菌接入普通肉汤培养基中，无菌操作插入Pb(AC)2纸条，37℃培养24h，观察结果。
三、 实验报告内容
1、说明平板划线法分离培养细菌的方法及注意事项，描述你的实验结果并分析原因。描述所钓取菌落的特征。
2、描述生化实验现象、结果，并用原理分析各生化实验结果及出现非理论结果的原因。
附表：理论结果